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J.-L. PERROT 



Reprenant alors des Limnées du même stock que celui sur lequel 

 je travaillais précédemment, en 1929, je me mis à l'étude de la 

 première division de maturation femelle, car c'est elle qui. par ses 

 dimensions et sa longue durée, est la plus favorable à de nombreuses 

 observations. 



La plus grande difficulté résidant dans la technique, la confection 

 des coupes en particulier, je crois qu'il n'est pas inutile de décrire 

 en détail les deux procédés que j'ai employés pour obtenir des 

 figures de plaques équatoriales ne permettant aucun doute sur le 

 nombre des éléments chromatiques. 



Tous ceux qui ont voulu étudier l'embryologie des Limnées 

 savent qu'il est impossible de couper des œufs entiers de ces Mol- 

 lusques, car les embryons sont entourés d'une masse d'albumine 

 qui durcit dans les bains successifs des déshydratants et des éclair- 

 cissants, pour finalement présenter au rasoir une résistance sem- 

 blable à celle d'une petite pierre, malgré tous les traitements 

 possibles préalables. Il est donc nécessaire d'isoler le germe de son 

 albumine dès que la fixation est achevée. 



Technique. 



Fixation. 



La ponte entière est coupée en quelques morceaux pour faciliter 

 la pénétration du fixateur, puis plongée dans celui-ci. Les mélanges 

 contenant de l'alcool sont peu favorables, car la masse albumineuse 

 de l'œuf se contracte en perdant sa forme globuleuse caractéristique. 

 Les fixateurs à base d'acide picrique, comme le mélange de Bouin, 

 donnent de bons résultats au point de vue chromosomique, mais 

 ils sont relativement longs à pénétrer. De plus, après une telle 

 fixation, il est fort difficile d'isoler plus tard l'ovocyte de son 

 albumine coagulée sans le léser. La manipulation est en tout cas 

 fastidieuse et le pourcentage des réussites est faible. Le liquide de 

 Carazzi (sublimé acétique nitrique) et surtout le sublimé acétique, 

 offrent au contraire tous les avantages. En 5 à 10 minutes, la ponte 

 entière est fixée en prenant un aspect opaque typique. Après un 

 lavage rapide à l'eau, les œufs sont séparés de leur gangue mucila- 

 gineuse et isolés un à un sous la loupe binoculaire, à l'aide de deux 

 pinces fines. En perçant la délicate membrane qui entoure l'œuf, 

 on dégage l'ovocyte de son albumine qui, sans être trop coagulée 



