CHROMOSOMES DE LIMNAEA STAGNA LIS 



par le sublimé, se désagrège facilement en libérant le petit embryon. 

 On obtient ainsi sans grande difficulté des ovocytes parfaitement 

 isolés et intacts. 



Méthode à V albumine. 



Cette méthode, qui est une modification de la technique décrite 

 par Belar, est basée sur la coagulation d'une albumine enrobant 

 des pièces trop petites pour être manipulées sans danger. Après 

 avoir aspiré les ovocytes avec une fine pipette de verre, on les 

 dépose dans une goutte d'eau sur une lame bien propre. Grâce à la 

 pipette et au papier buvard, on enlève délicatement l'eau qui est 

 remplacée par une goutte d'albumine de Mayer. Les ovocytes 

 sont alors groupés sous la loupe binoculaire de façon à former un 

 amas de 20 à 30 germes sur le plus petit espace possible, puis la 

 goutte d'albumine est coagulée par la chaleur d'une ampoule 

 électrique. En quelques minutes, l'albumine devient opaque, les 

 ovocytes sont pris dans cette gelée, qui va nous permettre de faire 

 toutes les manipulations successives sans blesser les minuscules 

 ovules qui n'ont guère plus de 60 microns de diamètre. 



Déshydratation et empar affinage. 



La lame est immédiatement plongée dans l'alcool (70°) iodé qui, 

 tout en éliminant le sublimé, achève la coagulation de l'albumine. 

 Après quelques minutes, on passe dans l'alcool à 95° puis dans 

 l'alcool absolu. Ces différents bains ne prennent pas plus d'une demie 

 heure. On coupe alors avec une lame de rasoir l'albumine de façon 

 à ne conserver qu'un petit bloc de quelques millimètres de surface, 

 contenant tous les ovocytes rassemblés, que l'on plonge dans le 

 toluol, après l'avoir détaché de la lame. Lorsque la transparence 

 est parfaite, après deux ou trois minutes, le bloc est transporté 

 dans la paraffine fondue (10 minutes). Après refroidissement, l'on 

 obtient pour finir un nid d'ovocytes inclus dans une gaîne d'albu- 

 mine coagulée, le tout parfaitement bien imprégné de paraffine. La 

 confection des coupes n'offre plus aucune difficulté. 



Lorsqu'il s'agit de faire des numérations de chromosomes très 

 précises, il n'est plus admissible, à moins d'un matériel particu- 

 lièrement favorable, de faire des lectures sur plusieurs coupes. Les 

 erreurs dues au passage du rasoir sont trop nombreuses. J'ai donc 

 augmenté le plus possible l'épaisseur des coupes qui, si l'on emploie 



