METODI PER LA COLORAZIONE DIFFERENZIALE DELLE NEUROFIBRILLE DI APATHY I 93 



nere insuperabili ; in sezione però son molto meglio quelli 

 all'ematoma o al cloruro d'oro. Mentre i preparati nei quali 

 la differenziazione, mediante la decolorazione della sostanza 

 interfìbrillare, non è stata spinta fino all'isolamento ottico 

 delle neurotibrille si conservano inalterati per degli anni, 

 quelli invece nei quali tale isolamento è stato ottenuto, si 

 scolorano tutti presto, conservandosi però almeno per una 

 settimana. 



una soluzione di bleu di metilene chimicamente puro, libero di cloruro di zinco, 

 medicinale, di Merk, in una soluzione acquosa di cloruro di sodio al 0,75 °/ 0 ; 

 se la soluzione colorante è all'I 0 00 si lascia agire per 10 minuti: se all'I o0 / 00 , 

 per I ora o I 1 \ ; se all'I 00 / 00) » per 3 ore ; queste cifre devono essere rad- 

 doppiate per il Lombrico, triplicate per il Gambero e per l'Unione, quadrupli- 

 cale per i nervi a nielina dei Vertebrati ; se poi si vuole anche la colorazione 

 delle cellule nervose, le cifre vanno pure triplicate e i nervi laterali dei gan- 

 gli e i cordoni connettivi longitudinali vanno tagliati. Dopo colorazione si lava 

 in una soluzione aa/uosa al 0,75 0 0 di cloruro di sodio; quelle colorate con 

 bleu di metilene I °/ 00 , per I ora; quelle all'i 00 / 00 , per 15 minuti; le altre, 

 niente, ^i tratta (o con una soluzione satura di picrato di ammonio, addizionata 

 di 5 gocce di una soluzione concentrata di ammoniaca per ogni 1 00 cm 3 , oppure 

 meglio) con una soluzione alV\ o al 2 °/ 0 di carbonato neutro di ammonio, 

 preparata di fresco saturala con picrato di ammonio, si lascia per 1 ora al- 

 meno, senza agitare e megh'o all'oscuro ; poi si mette in una piccola quantità 

 di una soluzione sa f nra di picrato in glicerina al 50 °/ 0 e si lascia fino a com- 

 pleta penetrazione; poi si porta in una soluzione satura di picrato nel seguente 

 miscuglio: glicerina al 50 °/ 0 parti 2; soluzione satura a freddo di zucchero parti I ; 

 idem di gomma arabici, pani l;dopo penetrazione si monta nella gomma-sciroppo 

 di Apdthy: (acqua dist. parti I; gomma arabica scelta I; zucchero di canna 1; si 

 scioglie a caldo e si aggiunge gr. 0,005 di formalina). L'ammoniaca agendo come 

 decolorante più rapidamente sulla parte protoplasmatica delle fibre nervose e sulia 

 loro sostanza perifibrillare o interfìbrillare che non sulle neuro fibrille, conduce a 

 una differenziazione regressiva artificiale di queste neurofibrille, le quali così ap- 

 paiono nettamente tinte in bleu-violetto La fissazione del colore però non è tale 

 da permettere V inclusione sia in paraffina, sia in celloidina. Si possono otte- 

 nere sezioni di 20 ;j . e talora anche meno includendo in gelatina-glicerina 

 (I p. in peso di gelatina in 6 di acqua dist.; 7 parti di glicerina pura; per 

 o^ni 100 gr. di miscela si aggiunga I gr. di acido fenico cristallizzato) fra due 

 pezzi di celloidina-glicerina secchi, sezionando a secco e montando in gomma- 

 sciroppo. (Cfr. ApÀthy. « Die .Mikrotechnik », pag. 172-173). 



Bollettino della Società Zoologica Italiana 



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