METODI PER LA COLORAZIONE DIFFERENZIALE DELLE NEUROFIBRILLE DI APATHY 195 



Materiale. — Vermi : Irudinei (Hi rado = Sanguisuga ecc ) 

 Lumbricus = Lombrico. — Crostacei : Astacus = Gam- 

 bero. — Molluschi: Anodonta = Anodonta; Unio = Unione; 

 Helix = Lumaca. — Vertebrati : Amphioxus = Anfiosso; 

 Petromyzon = Lampreda ; Lophius = Rana pescatrice; 

 Triton = Tritone ; Bos = Vitello. 



I vertebrati non si prestano così bene come gli inver- 

 tebrati (1). E sempre meglio adoperare individui adulti e il 

 più possibilmente grossi f non solo perchè le neurofibrille sono 

 più grosse, ma anche perchè sembrano più accessibili alla 

 differenziazione. • 



I pezzi non devono mai essere più grossi di J / 2 cm - 

 Fasi del processo : fissazione, colorazione in toto, inclu- 

 sione, sezioni in serie, balsamo. 



a) Fissazione e conservazione del materiale fissato. 

 I liquidi fissatori possono essere: sublimato; sublimato- 

 alcool ; sublimato-osmico ; sublimato-acetico ; sublimato-picri- 

 co-acetico ; acido roicrico ; liquido di Kleinenberg (acido pi- 

 cro-solforicoi; liquido di Zenker (liquido di Mailer cm. 3 100; 

 sublimato gr. 5 ; acido acetico gr. 5) ecc. — Questi liquidi 

 non devono mai essere adoperati a caldo. 



I pezzi fissati possono essere adoperati subito, oppure es- 

 sere conservati in alcool a 90°. 



b) Colorazione. — Piccolo o grosso, il pezzo deve stare 

 almeno 48 ore nella soluzione roloronte (2); tre giorni non 



il) // materiile miglio/ e, in genere, per la dilferenziazione delle neurofì- 

 brille con i diversi metodi è dato, secondo FA; (op. cit. pag. o03), dagli Ira- 

 dniei e dai Lombricidi, perchè: 1° le neurofibrille sono relativamente molto 

 grosse e non troppo profondamente situate, si colorano molto facilmente e si- 

 differenziano molto nettamente ; 2° tutta la line struttura del sistema nervoso 

 resta ben fissata ; 3° la disposizione e la costituzione del sistema nervoso si pre- 

 sta molto bene a una facile preparazione. 



(2) La soluzione di emateina L. A. si prepara col successivo miscuglio di 

 volumi uguali dei tre seguenti liquidi : a), b), c). 



a) Tintura di emateina all'I 0 / o in alcool a 70°. Si fa una soluzione di 

 cristalli di ematossilina in alcool a 70° purissimo, che cioè non sia nò acido, 

 nè tanto meno alcalino; si lascia p t sei od otto settimane a maturare (trasfor- 

 mazione per lenta ossidazione dell'ematossilina in emateina) in un vaso di ve- 



