METODI PER LA COLORAZIONE DIFFERENZIALE DELLE NEUROFIBRILLE DI APATHY 209 



2° Indurimento in alcool a 96°; durata 12-24 ore (1). 



3° Bagno nella seguente miscela (2): ammoniaca, del 

 peso specifico 0,95 circa, parti 1 ; acqua distillata, 3 ; alcool 

 a 96°, 8. Durata 12-24 ore ; temperatura massima 20° C ; i 

 pezzi diventano di un color giallo scuro. 



4° Trasporto in alcool a 96°; durata da 6 a 12 ore. 



5° Bagno nella seguente miscela : acido cloridrico, con- 

 centrato al 37 °/ 0 , del peso specifico 1,19, parti 1 ; acqua 

 distillata, 3 ; alcool a 96°, 8. Durata 24 ore ; temperatura 

 massima 20° C : i pezzi ritornano di un color giallo- chiaro (3). 



6° Trasporto in alcool a 96°; durata da 10 a 24 ore. 



7° Immersione in acqua per 2-6 ore al massimo. 



8° Bagno in una soluzione acquosa di molibdato am_ 

 BIONICO al 4 0 /°; durata 24 ore; temperatura massima 30° C. (4) 



9° Inclusione. — Breve lavaggio in acqua distillata; 

 trasporto in alcool a 96° (10-24 ore), in alcool assoluto (10-24 

 ore) e poi in xilolo (o in toluolo o in cloroformio); imparar', 

 fìnamento. 



acido nitrico concentrato, cioè al 65 °/ 0 circa (peso specifico 1,40); essa deve 

 essere tanto più forte quanto più bassa è la temperatura. 



Per ottenere la differenziazione delle neurofibrille è meglio usare acido 

 nitrico al 3-5 %i al ' a temperatura di I0°-15°-C; se si vuo'e ottenere invece 

 la rete di Go^i, acido nitrico al 7,5 °/ 0 a I2°-15°C, o anche più diluito ma a 

 I8 0 -20° G. Il colore che devono acquistare i pezzi deve essere un giallo-pallido. 



L'Embden (Op. eit. nella nota a pag. 191) adopera acido nitrice al 3 - o °/ 0 

 per 6 ore soltanto. 



(1) Vi può restare anche per molti giorni. In questo e negli altri passaggi, 

 tino all'inclusione, I'Embden (op. cit.) segue il metodo dì Bethe, abbreviando 

 la durata dei diversi bagni. 



(2 Questa miscela si prepara al momento di usarne aggiungendo 2 volumi di 

 alcool a 96° a 1 volume di una soluzione già preparata di ammoniaca a % j 4 . 



(3) Si omettano i passaggi 5 e 6 se si tratta di mettere in evidenza le 

 neurofibrille nelle cellule dei gangli spinali o la rete di Golgi nelle corna an- 

 teriori del midollo spinale ecc ; scopo del trattamento con l'acido cloridrico è 

 di dare ai tessuti una reazione acida e di renderli quindi più atti a fissare e a 

 trattenere il molibdeno. 



L'A. distingue un metodo I e II a seconda che si tratta o no il pezzo con 

 l'acido cloridrico. 



(4) Se si vogliono differenziare le neurofibrille, la temperatura sia di 

 10°- lo" C; se la rete di Golgi, 18° -30° C. 



Bollettino della Società Zoologica Italiana 



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