METODI PER LA COLORAZIONE DIFFERENZIALE DELLE NEUROFII5RJLLE DI AP.VTIIY 211 



12° Colorazione. — Si versa via lo strato cT acqua di- 

 stillata rimasto, si sciacqua brevemente per tre o quattro 

 volte in acqua distillata e si asciuga come sopra il vetrino ; 

 trasporto delle sezioni nel termostato, alla stessa temperatura 

 (55°-60° C), con sopra tino strato ugualmente alto (1 1 / 2 -2 rara.) 

 di ima soluzione all' 1/ 3000 di bleu di toluidina (1); durata 

 10 minuti (2). 



13° Montatura. — Si sciacqua rapidamente in acqua 

 distillata, e poi in alcool a 96°, per 1-2 minuti, fino a che 

 si sia portato via tutto l'eccesso di sostanza colorante che 

 non si è combinato col molibdeno ; poi si disidrata comple- 

 tamente in alcool assoluto, si passa due volte in xilolo per- 

 fettamente anidro per togliere le più piccole tracce di alcool 

 e si monta in balsamo di Canada anidro, usando preferibil- 

 mente quello neutrale di Grubler. 



dipendenza della natura dei tessuti, l'A. dice che per il cervello e per il cer- 

 velletto occorrono da 2 a (3 minuti; per il midollo allungato da 3 a 7; per il 

 midollo spinale da 5 a IO; ad ogni modo L'A. consiglia di fare prima dei ten- 

 tativi con tre porta-oggetti. 



Le neurofibrille si differenziano più presto che la rete di Golgi. Se pezzi 

 intieri o sezioni di pezzi giù trattati col molibdato secondo il n. 8 si trat- 

 tano per più di venti minuti con una soluzione 14 °/ 0 di molibdato, alla tem- 

 peratura di 4fr-60° C, si può poi ottenere la colorazione del cilindrasse, della 

 neuroglia, del nucleo, e delle zolle (corpi colorabili) di MssI; talora poi si 

 riescono ad ottenere differenziazioni in cui siano contemporaneamente visibili 

 le neurofìbrille e le zolle di Nissl; siccome però la differenziazione del cilindrasse 

 si compie presso a poco nelle stesse condizioni di quella delle neurofibrille, così 

 è ben diffìcile ottenere differenziati insieme, il cilindrasse e la rete di Golgi. 



L' A. raccomanda, per ottenere facilmente la differenziazione delle neu- 

 rofìbrille, le cellule delle corna anteriori del midollo di coniglio, di cane e d'uomo 

 idurata da 5 a 8 minuti); per la rete di Golgi, il Nucleo dentato e le Olive del 

 cane (durata da 2 a 6 minuti). 



L'Embdex (op. cit.) liscia le sezioni per 2-5 minuti in una stufetta a 

 paraffina, a 57° -60' C, con sopra uno strato di acqua distillata o di una solu- 

 zione all' l/ 300i; di molibdato ammonico. 



(1) Il bleu di toluidina (= bleu di genziana = bleu di Parma =■ bleu-alcool 

 = blcu-lucej è uno dei tanti colori di toluidina, la quale è un omologo del- 

 IVnilina. Cfr. Bolles Lee et Uenneguy. N. 158 e 172. 



(2) L'Embdev (op. cit.) dice c'ie in certi casi la colorazione riesce meglio 

 se si colora solo per 5 minuti. 



