SYMBIOSE ET TUBÉRISATION 



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loppent bien en milieu stérilisé. L'étude des cultures aseptiques 

 permettra de préciser les homologies et le mode de formation 

 des tubercules et fournira le moyen d'apprécier l'influence 

 de l'endophyte sur le développement de la plante. 



15. Développement en milieu aseptique. — Des graines 

 à'Orobus tuberosus, stérilisées par une immersion de six heures 

 dans l'eau oxygénée, sont transportées aseptiquement sur 

 des plaques de coton imbibées d'eau de source, préalable- 

 ment stérilisées et renfermées dans des fioles de culture 

 triangulaires. Les premières germinations apparaissent peu 

 de jours après le semis, mais d'autres ne se produisent qu'au 

 bout de plusieurs mois. Toute graine qui germe est aussitôt 

 transportée, au moyen d'une anse de platine flambée, dans 

 un large tube de culture renfermant le milieu nutritif 

 suivant, stérilisé à l'autoclave : 



Sulfate de magnésium 0g r ,5 



Sulfate de sodium 0g r 5 5 



Nitrate de potassium 0g r ,5 



Phosphate hipotassique 0s r ,5 



Chlorure de calcium 0§ r 5 5 



Tartrate de potassium 0s r ,5 



Tartrate ferrico-potassique 0s r ,01 



Gélose à 8,7 p. 1 000 dans l'eau distillée 1 000 cent, cubes (1). 



Les nombreuses graines qui ont été semées dans de telles 

 conditions ont donné des plantules qui, cultivées aseptique- 

 ment sur le milieu ci-dessus, ont évolué suivant un type 

 uniforme. Les cotylédons, au moins au début et parfois 

 pendant toute la durée du développement, restent inclus 

 dans le tégument de la graine, et l'axe hypocotylé demeure 

 court ; la germination se manifeste d'abord par l'apparition 

 d'une radicule bientôt ramifiée et d'une tigelle qui se diffé- 

 rencie en une haute tige feuillée, atteignant rapidement une 

 hauteur de 10 centimètres en moyenne, à entre-nœuds al- 

 longés, à feuilles bien développées et pourvues de deux fo- 

 lioles ; cette tige primaire se bifurque souvent au niveau de 



(1) L'abaissement du point de congélation de cette solution minérale est 

 égal à 0°,09. La technique de la préparation de la gélose nutritive est donnée 

 en appendice. 



