APPENDICE 



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On obtient ainsi une gélose nutritive ayant la composition men- 

 tionnée ci-dessus (§ 15). 



Techniques histologiques. — Les racines et tubercules destinés 

 aux examens histologiques ont été fixés dans le liquide suivant ; 



Eau distillée 10 cent, cubes. 



Acide nitrique 5 — ■ 



Formol du commerce 5 



Acide picrique à 1 p. 100 dans l'alcool à 95° 80 — 



Pour la coloration des coupes, en outre des méthodes de double 

 coloration employées par Noël Bernard [5], j'ai employé cou- 

 ramment la thionine phéniquée, qui donne de bonnes différen- 

 ciations cytologiques des Champignons, malheureusement très 

 fugaces. 



La méthode suivante, empruntée à M. Legroux (1), donne una 

 bonne coloration des membranes de l'endophyte : 



Après dissolution de la paraffine, la lame est lavée à l'alcool 

 méthylique, puis transportée face en dessus dans une boîte Laveran- 

 Mesnil, et recouverte avec 1 centimètre cube du mélange colorant 

 suivant : 



Éosinate de bleu de méthylène 7 grammes. 



Éosinate de bleu de toluidine l§ r ,5 



Bleu de toluidine 0« r ,5 



Alcool méthylique à 99°, 5 490 cent, cubes. 



Après une minute, verser 4 centimètres cubes d'eau distillée 

 neutralisée au rouge neutre ; retourner la lame après mélange ; 

 au bout de dix à quinze minutes, laver à l'eau ordinaire, diffé- 

 rencier avec une solution de tanin orange au quart dans l'eau dis- 

 tillée neutralisée. Déshydrater à l'alcool éthylique, passer au to- 

 luène, monter à l'huile de cèdre. 



Ce travail a été fait à l'Institut Pasteur et, en partie, au labo- 

 ratoire de Botanique du Muséum d'Histoire naturelle, dirigé par 

 M. J. Costantin. J'adresse mes plus sincères remercîments à 

 M. Costantin pour l'accueil que j'ai trouvé dans son laboratoire 

 et pour les nombreux encouragements qu'il m'a donnés. 



(1) Voir Legroux (R.) et Magrou (J.), Ann. Institut Pasteur, t. XXXIV,, 

 1920. 



