222 J. MOURET. — CONTRIBUTION A L'ÉTUDE 
vent plus être considérées comme absolument normales. Nous 
avons toujours prélevé les fragments de glande sur l'animal vivant. 
De petits morceaux ont été fixés soit dans le liquide d'Àltmann 
(solution d'acide osmique a 2 p. 100, i vol. ; solution de bichromate 
de potasse à 5 p. 100, 1 vol.) pendant trente-six à quarante heures, 
soit dans le liquide de Kleinenberg, ou le liquide de Roule (solu- 
tion saturée de biclilorure de mercure, acide acétique cristallisable 
2 p. 100) pendant vingt-quatre heures. Les pièces ont élé incluses 
dans la paraffine après avoir élé déshydratées par des alcools de 
plus en plus forts, et être ensuite passées successivement dans un 
mélange d'alcool absolu et de toluène, dans du toluène pur, dans' 
un mélange de toluène et de paraffine et enfin dans la paraffine à 
l'étuvc à 50°. Les coupes ont élé faites au microtome à bascule. 
C'est après fixation de la glande par le liquide d'Allmann que 
nous avons pu étudier la formation de vacuoles dans le proto- 
plasma des cellules; c'est au contraire sur les pièces fixées par le 
liquide de Roule ou par celui de Kleinenberg que se dessinent le 
plus nettement les corpuscules paranucléaires. 
Les tissus fixés par l'Altmann sont parfois trop noirs, môme après 
un lavage prolongé à l'eau courante. Il nous a paru que si on 
plonge pendant vingt-quatre heures les coupes, collées sur la lame, 
dans le liquide de Gram (iode 1, iodure de k. 2, eau 300), elles 
deviennent plus claires, après qu'on en a chassé l'iode par l'alcool. 
Nous les avons colorées avec la safranine, ou bien avec la fuchsine 
acide suivant la méthode d'Altmann *. 
Les colorants, qui nous ont le mieux réussi pour les pièces fixées 
par le Kleinenberg ou le Roule, sont l'hématéine, et surtout l hé- 
matéine et la fuchsine acide. On colore pendant 3 minutes avec 
l'hématéine, on lave à l'eau, puis on surcolore avec la fuchsine acide 
(solution à 20 p. 100 dans eau anilinée) : chauffer légèrement, 
laisser refroidir, et laver à l'eau jusqu'à ce que les granulations 
seules restent rouges. Les parties colorées par l'hématéine sont 
violettes : on peut les rendre bleu de ciel en exposant aux vapeurs 
d'ammoniaque pendant quelques secondes la coupe bien imbibée 
d'eau. La coloration alors ressort bien mieux, et ne gêne en rien 
l'action de la fuchsine acide. 
1. Altmann, Die Elementarorganismen, 2' édit , 1894. Leipzig (Veit et C ie ). 
