564 ÉD. RETTERER. — STRUCTURE ET HISTOGENÈSE DE L'OS. 
dense à aspect presque liomogène. Du côté opposé, c'est-à-dire 
vers l'ostéoblaste, les fibrilles sont plus distantes les unes des 
autres; elles sont courtes, se coupent à angle presque droit et 
figurent un réseau étroit, mais des plus réguliers. » 
Depuis celte époque, j'ai étendu ces recherches aux mammifères 
jeunes et adultes (chien, chat, cobaye), ainsi qu'à quelques oiseaux. 
Je crois être arrivé à bien fixer le tissu osseux, à le décalcifier 
ensuite sans le gonfler, ni l'altérer, et à en différencier les élé- 
ments par des colorants distincts. 
Outre quelques colorants particuliers que je mentionnerai à 
l'occasion, voici la méthode générale qui m'a donné les meilleurs 
résultats au point de vue des éléments cellulaires, de la substance 
fondamentale et des rappoi-ts génétiques des diverses parties de l'os. 
Je fixe des fragments d'os frais dans le liquide de Zenker ou la 
solution formol-picro-sublimé-acétique. Pour assurer la pénétration 
complète et rapide, je divise au maillet la diaphyse des os longs 
avant de les mettre dans le fixateur. 
Après lavage prolongé, je conserve les pièces dans l'alcool. Pour 
en faire des coupes sériées dans la paraffine, je les décalcifie à 
l'aide de la solution picro-nitrique de Kleinenberg, je les désjiydrate 
rapidement, pour monter et inclure d'après mon procédé (sulfure 
de carbone et inclusion dans le vide); et ensuite je les débite en 
coupes de 7 à 10 a. Les coupes sont colorées pendant douze heures 
dans une solution concentrée de safranine anilinée * ; puis dans 
l'hématoxyline durant quatre heures ou davantage. Les coupes 
deviennent noires, si on les lave ensuite dans l'eau courante. Dans 
le cas où la teinte rouge de la safranine a pâli, je remets les coupes 
à nouveau pendant dix minutes dans un bain de sâfranine anilinée. 
Ensuite je les décolore en les faisant séjourner pendant quelques 
minutes dans l'eau additionnée de quelques gouttes de la solution 
picro-nitrique. Enfin je les déshydrate et les monte dans le baume. 
Le côté délicat de la méthode consiste dans la décoloration : il 
faut la surveiller et la contrôler à tout moment au microscope et 
souvent, sur une dizaine de coupes collées sur la même lame et 
1. Bouma, Cenlralblalt f. medic. Wissenschaften, 1883, p. 866, montra que la 
solution aqueuse de safranine à 1/2000 colore le tissu osseux en rose. A. Aurelio da 
Costa Ferreira, A technica histologica e as tlieorias da Osteogenese, Coimbra, 1903, 
p. 14, employa la solution alcoolique à 1/100 qui teint à peine le tissu osseux adulte, 
mais colore en rose pâle la substance osseuse en voie de formation. Aussi conclut-il 
que la safranine en solution alcoolique permet de reconnaître la substance fréosseuse. 
