DE LA MICROCHIMIE. 375 
obtenue en traitant ensuite ces graisses osmiquées par l'alcool 
(Handwerk, 1898). La coloralion secondaire que Ton obtient 
dans ces circonstances est beaucoup plus intense que la colora- 
tion primaire ; le nombre des granules colorés en noir est beaucoup 
plus considérable; cette coloration secondaire est attribuée par 
Handwerk à l'hydratation du tetroxyde d'osmium. 
C'est, comme Wlassak (1898) et d'autres l'ont déterminé, la 
graisse neutre produite dans les centres nerveux et les nerfs dégé- 
nérés qui se colore par le tétroxyde d'osmium dans la méthode de 
Marchi-Algeri. 
On sait que plusieurs matières colorantes sont employées pour la 
coloration de la graisse : le Sudan III, le Scharlack ou Fettponceau, 
TAlkanna (orcanette), la cyanine ou bleu de quinoléine. 
Le Sudan III ou azo-benzène-azo-naplitol a été introduit dans la 
technique histologique par Daddi (1896). On l'emploie en solution 
alcoolique; le titre de l'alcool ne doit pas dépasser 80°, pour 
éviter que la graisse se dissolve. On lave à l'alcool et on monte 
dans la glycérine ou l'huile de paraffine. La graisse est colorée en 
rouge orangé plus ou moins intense. Daddi prétendait que les 
acides palmitique et stéarique purs prennent la coloration; mais 
Rieder (1898), Handwerk (1898), Mann affirment que cela est 
inexact. Michaelis (1901) a recherché quel était dans le Sudan III le 
groupement auquel la graisse devait sa coloration, et il a trouvé 
que dans l'azobenzèneazonaphtol, ce qui est le facteur essentiel 
de la coloration, c'est la position ortho du groupe hydroxyle. 
La couleur s'unit avec l'acide oléique et avec l'oléine, parce que 
ces graisses ne sont pas saturées, non avec les acides palmitique 
et stéarique et leurs graisses neutres. 
Le Scharlach ou Fettponceau est un azo-orthotoluol-azo- 
naphtol. La graisse se colore en rouge intense dans une solution 
alcoolique de Scharlach. On peut faire les mêmes remarques pour 
le Scharlach que pour le Sudan en ce qui concerne la coloration 
élective de la graisse oléique seule, et l'explication chimique de la 
réaction. 
L'orcanelte introduite dans la technique par Dippel (1896) colore 
les acides et les savons gras. Friedenthal (1900), ayant rempli une 
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