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Gewebe beobachtet werden müssen. Soweit es sich um junges, unverholztes Material handelte, habe 
ich deshalb in der Regel mit Mikrotomschnitten von5— 10;tt Dicke gearbeitet. Die Fixierung der In- 
ternodienstücke wurde anfangs mit Eisessig-Alkohol (50:50) später nur mit absolutem Alkohol (Dauer 
der Einwirkung 24 Std.) ausgeführt. Die so hergestellten Mikrotomschnitte wurden nun auf verschiedene 
Weise weiter untersucht. Die für die Kieselerkennung mehr negativen Färbeverfahren reichen vielfach 
für sich allein nicht aus. Es wurde deshalb in erster Linie immer mit Phenol gearbeitet, in zweifel- 
haften Fällen Färbung und Behandlung mit Phenol nacheinander angewandt. Handschnitte wurden, 
wenn möglich, stets auch noch geglüht. 
Der erste, der meines Wissens Phenol zur besseren Erkennung von Verkieselungen benützte, 
war 0. Müller, bei seinen Diatomeenuntersuchungen (1871). Er „überschwemmte" seine Objekte 
mit verschiedenen Flüssigkeiten u. a. auch mit Nelkenöl und mit Carbolsäure, doch handelte es sich 
hier nur um eine gelegentliche Bemerkung. Später (1897) wurde das Phenolverfahren dann gleich- 
zeitig von Küster und Gr r o b , denen diese Studien Müllers offenbar unbekannt geblieben sind, 
von neuem eingeführt und weiter ausgebaut. Seither wurde es bei Arbeiten über Kieselsäure vielfach 
mit Erfolg angewandt (W i e 1 e r , Kap h ahn). Die Wirkung des Phenols besteht darin, daß sein 
Brechungsexponent (1,535) von dem der Kieselsäure (Tabaschir: 1,119 — 1,364) wesentlich verschieden ist, 
mit dem des übrigen Grewebes sich aber offenbar nahezu deckt. Die Folge davon ist, daß alle Zell- 
wände und Zellinhalte fast durchsichtig werden, alle Verkieselungen aber scharf hervortreten. 
Sichere, kompakte Verkieselung ist vorhanden, wenn sich in Phenol der von Küster be- 
schriebene rötliche Grlanz einstellt, wie er namentlich bei den stark lichtbrechenden Kanten, Ecken 
und auch bei Membranen ausgeprägt ist. Der fertig ausgebildete Kieselkörper der Gramineen erscheint 
bei scharfer Einstellung rötlich glänzend, bei zu tiefer weißlich, bei zu hoher ist er dunkel. Alle 
Unebenheiten treten besonders hervor. Die punktförmigen Bläschen sind scharf umrandet und meist 
dunkler als die übrige Füllmasse. Isolierte Kieselkörper zeigen stets nach außen einen durch Brechung 
hervorgerufenen rötlichen Schimmer. Phenol läßt jedoch nicht, wie Küster erklärt, 
jede auch die feinste Verkieselung deutlich erkennen. Dünne Kieseldecken sind 
von der Fläche vielfach nicht sichtbar; daß z. B. die Cuticula fast durchweg verkieselt ist, ergibt sich 
erst aus ihrer Kantenansicht in Längs- und Querschnitten. Dementsprechend stellt sich auch bei allen 
Membranen, die wir in der Kantenansicht beobachten, der rote Glanz sofort mit der Verkieselung ein. 
Ich werde später noch genauer auf diese Tatsachen zurückkommen. 
Vor der Übertragung der Schnitte aus Phenol in Balsam habe ich sie nach Küsters Vorgang 
stets noch eine Zeitlang in Nelkenöl gelegt. Sowohl in Nelkenöl (Brechungsexponent 1,547) als auch 
in Balsam sind die Kieselkörper noch sehr gut zu erkennen. Zimmtöl , Bromoform und Monobrom- 
naphtalin schienen mir trotz ihrer hohen Brechungsexponenten weniger geeignet. Auch Glyzerin ist 
nicht so günstig wie Phenol, da die Umrisse des Kieselkörpers nicht scharf zu erkennen sind. Derselbe 
erscheint milchweiß und schließt auch hier nach außen mit einer rötlich lichtbrechenden Kante ab. 
Fast alle behandelten Arten wurden auch in entkieseltem Zustand untersucht. Die Internodien- 
stücke wurden zu diesem Zweck einige Zeit in Flußsäure gekocht und dann mit dem Rasiermesser 
oder dem Mikrotom geschnitten. Da es sich bei den dann folgenden Untersuchungen in erster Linie 
um die Membranen der Kieselzellen handelte und um die Frage nach einer etwa vorhandenen orga- 
nischen Grundlage des Kieselkörpers, so dienten als Reagentien vor allem Chlorzinkjod und Kongorot. 
