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Durch Herrn Prof. v. T u b o u f wurde Verfasser auf eine Methode der Sporengewinnung aufmerksam 
gemacht, durch welche es ihm ausnahmslos gelang, fremde Keime abzuhalten. Von den mehrere Hundert 
zählenden Kulturen waren nur zwei durch fremde Pilze verunreinigt worden; die Verunreinigung war in 
diesen Fällen dadurch verursacht worden, daß das hymeniale Gewebe selbst schon allen möglichen Ver- 
unreinigungen ausgesetzt gewesen war. Es wurden stets solche Fruchtkörper bevorzugt, bei denen das 
Velum noch nicht zerrissen war. 
Die Methode der Sporengewinnung bestand in der Verwendung von zwei Zinnkapseln, wie sie zum 
Verschluß von Weinflaschen Verwendung finden. Die eine wird siebartig dm-chlöchert, die andere darüber 
gestülpt. War das Substrat im Erlenmeyerkölbchen untergebracht, dann wurde zuerst die durchlöcherte, 
dann die undurchlöcherte Kapsel, in deren Boden angefeuchtete Watte gesteckt worden war, darüber ge- 
stülpt, dann das Ganze im Autoclaven sterihsiert, wenn es sich um Brot oder Humus als Nährmedium 
handelte. Wurde Nährgelatine verwendet, dann mußte, da diese im Autoclaven die Gerinnungsfähigkeit 
verliert, fraktionierte SteriHsation im Dampftopf angewendet werden. Die angefeuchtete Watte hatte den 
Zweck, einen Tm'gor der Zellen des verwendeten Hymeniums und damit ein Ausgeschleudertwerden der 
Sporen zu bewirken. War die Sterilisation vollzogen, dann wurde das Kölbchen in strömenden Dampf 
gestellt, mit sterilisiertem Skalpell ein Stück aus dem hymenialen Teile herausgeschnitten, dieses auf die 
durchlöcherte Kapsel gelegt und darüber die undurchlöcherte gestülpt. Nach drei bis vier Stunden, 
spätestens nach einem halben Tage, wurden die Kapseln weggenommen und der Kolben mit sterilisierter 
Watte verschlossen. 
Eine andere Methode gelang dadurcli, daß in eine sterilisierte Petrischale mit sterilisierter Nähr- 
gelatine ein ausgeglühtes und mit absolutem Alkohol abgekühltes Dralitnetz, mit dem hymenialen Gewebe 
obenauf, gelegt wurde. Ging die Keimung vor sich, dann wurde das Mycel auf Brot oder Humus über- 
geimpft, wenn nicht, eine Anzahl der Sporen samt der Nährgelatine. Damit die Sporen in diesem Falle 
in Berührung mit dem neuen Substrat kamen, wurde dieses von außen her durch heißes Wasser bis zum 
Schmelzen der Gelatine erwärmt. 
4. Keimung und Wachstum; Impfungen. 
Wie schon erwähnt, erfolgte Keimung nur bei einem Teile der Pilze. Unter diesen waren wiederum 
einige, deren Mycel bald nach der Keimung abstarb. Es ist möglich, daß die Säure daran schuld war, 
wahrscheinlich ist es nach den Ergebnissen nicht. 
Bei den übrigen wiu'de die Keimung auch nicht ohne weiteres erzielt. Die gewöhnliche Gelatine- 
kultur war bei Agaricus albus resultatlos geblieben. Angeregt durch die Versuche von v. T u b e u f , 
H a r t i g und Möller in bezug auf die stimulierende Wirkung der phosphorsauren Salze, brachte 
Verfasser die Sporen auf Nährgelatine, welche mit einer einprozentigen Lösung von (NH4)3P04 bereitet 
worden war. v. T u b e u f hat zuerst darauf hingewiesen, daß sich die drei Salze der Phosphorsäure 
verschieden verhalten je nach der Reaktion, daß nur NH4 Hg PO4 das Mycelwachstum — es handelte 
sich um den Hausschwamm — fördert, daß dagegen die beiden andern Salze schädlich wirken, sobald 
dadurch das Substrat seine sauren Eigenschaften verliert. 
1908 hat Miß Rumbold ^) in einer Arbeit über einige holzzersetzende Pilze diese Tatsache auch bei 
diesen festgestellt. Um jedoch auch bie Brefeldsche Beobachtung von der Schädlichkeit der Säure in 
Betracht zu ziehen, wurde zuerst das alkalische tertiäre Salz verwendet und die Säure des Substrats damit 
fast bis zur neutralen Reaktion abgestumpft. Es trat wolil Keimung ein, das Wachstum des Mycels war 
jedoch sehr gering. Die Impfungen auf ein Substrat, dessen Säure infolge Verwendung von NH4 Hg PO4 
nicht abgestumpft war, hatten bedeutend besseres Wachstum zur Folge. Die Keimung konnte auf Nähr- 
') Rum bold: Beiträge zur Kenntnis der Biologie holzzerstörender Pilze. Naturw. Zeitschr. für Land- und 
Forstwirtsch. 1908, 2. Heft. 
Bibliotheca botanica. Heft 76. 2 
