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non è più visibile la vescicola germinativa, non è raro il caso, che, malgrado la 
più grande attenzione, il materiale non riesca preparato bene, o vada perduto. 
Per rendere improbabile il pericolo di considerare come prodotti naturali quelli 
artificiali '), mi son servito di una tecnica varia, e mi sono attenuto ai fatti 
che solo con la maggioranza dei metodi impiegati ho potuto constatare ; poiché 
se è pur vero che molte delle accuse mosse dal Fischer (99) ai metodi moderni 
di fissazione e di colorazione sono esagerate 2 ), ciò non pertanto alcune di esse 
debbono esser tenute in considerazione da chi si occupa della minuta struttura 
cellulare. 
Ho cominciato quindi naturalmente col servirmi solo di materiale in ottime 
condizioni, tolto da animali provenienti quasi tutti direttamente del mare; poi- 
ché sebbene lo Scylliwm si riproduca anche negli acquari i, alle volte, in animali 
che avevano soggiornato qualche tempo nei bacini ho osservato un numero enorme, 
superiore di molto a quello normale, di oociti in degenerazione. Parimenti è ne- 
cessario usare solo materiale estratto da animali viventi, poiché gravi alterazioni 
post-mortali avvengono con istraordinaria rapidità negli oociti dei Selacii. 
I fissatori da me provati sono stati numerosi: liquidi di Flemming (mi- 
scela forte), di Zenker, di Hermann, di vom Rath, di Tellyesniczky, di 
Bouin. di Gilson, varie soluzioni di sublimato, in acqua distillata, in acqua 
di mare, in alcool assoluto, inoltre soluzioni di acido picrico, di acido nitrico 
(10 0/ n), di acido cromico (Vs-1 %), e di formalina (4-10 % in acqua di mare), 
e di acido tricloracetico (10 "A,). Alcuni di tali fissatori sono stati anche usati 
riscaldandoli ad una temperatura di circa 35° C. 3 ). Naturalmente dei liquidi 
impiegati alcuni si sono mostrati per lo meno superflui , altri , fra cui le so- 
luzioni di formalina, di acido tricloracetico, di acido nitrico, il liquido di 
Tellyesniczky e l'acido picrico poco adatti o cattivi. La soluzione di sublimato 
in alcool assoluto, che contiene il 33 "/„ di HgCP, solo in alcuni casi mi ha pre- 
stato dei servizii discreti , poiché di solito ha tendenza spiccata a contrarre ì pezzi, 
e inoltre talora sposta gli elementi cromatici. 
In generale ho ottenuto i migliori risultati dai noti liquidi di Flemming, 
di Hermann, di Zenker, e dal liquido ottenuto dissolvendo a saturazione il 
sublimato nella soluzione già satura di acido picrico in acqua. Va da sé che gli 
stessi fissatori non sono consigliabili per oociti in differenti stadii di sviluppo; 
e così mentre i liquidi di Flemming e di Hermann sono preferibili per gli 
oociti molto piccoli, il liquido di Zenker, le miscele sublimato-picriche, il su- 
blimato acetico sono preferibili per gli ovuli che hanno 3-15 mm. di diametro. 
Gli oociti aventi tal diametro vanno staccati dall'ovario e posti rapidamente nei 
fissatori. I varii fissatori usati si sono mostrati , in genere , poco favorevoli per 
la conservazione degli oociti giovanissimi, sia per ciò che riguarda la conserva- 
l ) Questi 9) l'ormano con relativa facilità in elementi così ricchi di sostanze allmminoidi più 
0 meno Huide quali gli oociti di Selacii ; anzi più innanzi accennerò a qualcuno di essi. 
*) Ct'r. specialmente le critiche fatte al Fischer da Apàthy (01), Janssens (01). Vej- 
dovsky e Mrazek (Oli). 
') Temperature superiori a quella in dicata danno al carioplasma di solito un aspetto spicca- 
tamente granulare, molto differente da quello che si ottiene coi fissatori a freddo. 
