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zione del nucleo, che quella del citoplasma. La fissazione prolungata permette di 
ovviare in parte a questo inconveniente, e un soggiorno di 24 ore nel sublimato, di 
24-48 ore nel liquido di Zenker, di parecchi giorni in quello di Flemmingè 
molto raccomandabile; ciò nonostante però spesso da pezzi egualmente grossi e trattati 
contemporaneamente, e nello stesso modo, si possono avere risultati molto diversi. 
Per ciò che riguarda il trattamento seguente alla fissazione mi sono con- 
vinto che i lunghi lavaggi con l' acqua che spesso vengono consigliati , sono 
decisamente dannosi ai grossi oociti dei Selacii, e che invece il trattamento di- 
retto con gli alcooli ') è molto da preferirsi. I pezzi fissati col bicloruro di mer- 
curio, o con liquidi che ne contengono, vanno accuratamente privati d'esso colla 
tintura di iodio, e ciò specialmente se non possono essere tagliati presto. Se si di- 
mentica tale precauzione, e si cerca p. es. di togliere dopo molti giorni i preci- 
pitati dovuti airHgCr", nel nucleo si vedono, nei preparati colorati e montati, dei 
corpuscoli rotondi, chiari, aventi spesso nel centro un granulo che si colora forte- 
mente s ), e che io in sul principio avevo creduto dover riportare a parassiti. 
Come intermediario ho usato il benzolo , che si volatilizza rapidamente e 
permette di tenere breve tempo nella paraffina i pezzi, cosa necessaria ^quando si 
ha da fare con oociti che contengono molto vitello. Per questi ultimi, per lo studio 
del nucleo, è bene procedere come indica il Kastschenko (00), cioè togliere men- . 
tre sono in alcool le « Keimscheiben » contenenti la vescicola germinativa, fa- 
cilmente visibile ad occhio nudo, e procedere come di solito. 
Operando in tal guisa è possibile il poter ottenere piuttosto facilmente se- 
zioni seriali di 5-10 ja, specialmente se nei casi un po' difficili si collodiona la 
superficie dei tagli. Questi di solito sono stati eseguiti con uno spessore di 10 fi, 
poiché a parer mio sezioni più sottili , oltre ad essere spesso molto friabili, sono 
anche svantaggiose allorché si debbono seguire come nel caso nostro dei lunghi 
filamenti cromatici. 
Per la colorazione delle sezioni mi son giovato specialmente di varie ema- 
tossiline (Ehrlich, Delafield) e specialmente di quella ferrica, secondo He i- 
denhain ' , inoltre dell' emacalcio e dell' emallume. Il carminio boracico tanto, 
') I pezzi fissati con liquidi a base di bicromato di potassio vanno in tal caso, come è noto, 
tenuti al buio. 
*) Esperienze istituite al riguardo mi hanno convinto di tal fatto. Oociti di 8 min. fissati con 
Zenker furono lasciati molti giorni in alcool a 70° (senza tintura di jodio), inclusi e tagliati. Le 
sezioni sparaffinate mostravano nel citoplasma e nel nucleo numerosi ammassi sferoidali o mam- 
mellonari, dovuti all'azione del sublimato , sui quali la tinctura jodii diluita , agendo , dava luogo 
ai corpi descritti, come poteva vedersi facilmente eseguendo le operazioni sotto al microscopio. Altri 
oociti presi dallo stesso ovario da cui furono presi i precedenti, e subito trattati abbondantemente 
con la tintura di jodio, o fissati con acido cromico, mostrarono sempre il nucleo privo dei corpu- 
scoli esaminati nel caso precedente. 
s ) Per il differenziamento dei preparati colorati coli' ematossilina ferrica mi sono servito con 
vantaggio della modificazione indicata dal Tr etiakoff (04). Questi differenzia le sezioni dapprima 
un po' con 1' allume ferrico, indi continua con una soluzione di acido cloridrico all' 1 °/ 0 . Si ha 
cosi il vantaggio di avere la sostanza cromatica colorata più intensamente dei granuli di vitello, 
cosa di grande utilità allorché si debbono esaminare preparati coi fusi polari , e quelli in cui la 
vescicola germinativa è in dissoluzione. L'acido nitrico, il tricloracetico (in soluzione al 2 °/ 0 ) ed 
altri acidi possono usarsi del pari, ed anche senza cominciare lo scoloramento coll'allume ferrico. 
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