H. Ludwig (XIII) nel 1881 studiò lo sviluppo deWo scheletro calcareo , dandoci 
per il primo esatte conoscenze per ciò che riguarda le piastre ventrali e dorsali. 
N. Chrislo-Aposlolides (II) nel '82 comincia a ricercare dell'uovo e corregge 
un errore del Metschnikoff circa la formazione dell'entoderma. Per il primo nota 
l'esistenza dell'ano nella larva. 
W. Fewkes (IX) nell'anno '86 studia nuovamente la segmentazione e la formazione 
dell' enioierma con le aperture della larva (bocca ed ano). Studia ancora la formazione 
dello scheletro calcareo embrionale e 'permanente^ e da ciò ricava delle vedute morfolo- 
giche riguardanti omologia con quello degli altri Echinodermi. 
P. H. Carpenter (VI) infine nell'S? dallo studio sullo scheletro, nota ancora 
alcune omologie ed alcune differenze nello sviluppo del sistema amicale nelle specie vi- 
venti in Europa e quelle viventi in America. 
Altre osservazioni che riguardano lo sviluppo déW Amphiura squamata trovansi 
qua e là in lavori di indole generale,- come sarebbero quelle del Bury (IV) e del Cu é- 
not(VII). 
Esporrò nel corso del lavoro, al principio di ogni paragrafo, e quando il bisogno 
lo richiedesse per comodità, le osservazioni fatte da ciascuno degli osservatori prece- 
denti, sia per far rilevare le differenze dei risultati ai quali io son pervenuto con le 
presenti ricerche, sia per mettere a corrente il lettore dei punti controversi. 
Tecnica. — La tecnica impiegata principalmente è stata quella della rf?ssocmz2one : 
i tagli furono fatti, sia per comprovare le osservazioni fatte con questo metodo, sia per 
studiare l'apparecchio riproduttore che a fresco riesce impossibile esattamente j)repa- 
rare. Entrambi i metodi, non ancora usati dai precedenti osservatori, come sussidiarli 
l'uno dell'altro, essendosi esclusivamente serviti della dissociazione, oltre a dare alle 
presenti ricerche una sulFicienle esattezza, han fatto si che si potessero allargare le co- 
noscenze riguardanti, cioè, lo studio degli embrioni in avanzati stadii dello sviluppo. 
L'impiego della dissociazione però, rende lo studio delle larve abbastanza lungo, per- 
chè non solo bisogna essere così pazienti da cercare in molti animali dissociati in acqua 
di mare quegli stadii necessari! ad illustrarne lo sviluppo, ma, dopo trovati , stante la 
loro piccolezza, bisogna aver molta cura nell' isolarle e con un contagocce portarle su 
altro porta-oggetti per poter fare osservazioni con maggiori ingrandimenti. In queste 
condizioni l'osservazione si rende sicura, tanto più che riesce agevole volgere la larva 
in tutti i sensi, movendo con gli aghi il coprioggetti, o comprimerla a volontà dopo 
che si è dato una voluta posizione, diminuendo, mercè carta bibula, la quantità di ac- 
qua di mare. Per conservare queste larve usavo esporle ai vapori di acido osmico per 
un 2 0 3 secondi e le osservavo quindi, colorando come ordinariamente si usa. Per i 
primi stadii dello sviluppo non occorre alcuno di questi procedimenti , presentando le 
cellule di ciascun foglietto una colorazione tipica. Per i tagli gli animali non venivano 
decalcificati per non spostare i rapporti dello scheletro calcareo degli en)brioni in essi 
contenuti. I mezzi fissatori e coloranti impiegati sono stati quelli che ordinariamente 
si usano in questa Stazione Zoologica. A preferenza però, ho usato il sublimato (soluz. 
2*/o) caldo in cui lasciavo gli animali pochi secondi per poi rimetterli in altro freddo 
secondo il solito. Ilo usalo però, anche di fissare con acido osmico (2 V„) o con il li- 
quido di Flemming e poi di decalcificare con alcool (30V(,) leggermente acidulalo. 
