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M. W. BEIJERINCK ET A. VAN DELDEN. 
quelques rares germes de Granulohacter qui, en dépit de toutes nos 
précautions, avaient été présents dans la matière d'infection considérée 
à tort comme pure, et avaient ainsi passé dans le liquide nourricier 
ou y étaient tombés lors de l'infection. Mais, ainsi que nous l'avons dit 
tantôt, après de nombreuses expériences, il n'était plus possible de dou- 
ter de l'exactitude de nos observations. 
Toutes les espèces du genre Granidohmter perdent facilement leur 
pouvoir fixateur d'azote libre par une culture prolongée à l'air, comme 
c'est le cas p. ex. pour les cultures pures sur un terrain solide. 
La preuve de ce fait nous a paru importante et nous a engagés à insérer 
dans les tableaux mainte détermination qui autrement n'aurait pas dû 
être prise en considération, eu égard à la faible quantité d'azote fixée. 
Mais, comme ces déterminations se rapportaient toujours à des cultures 
qui, au commencement, c. à d. après leur isolation récente, avaient 
donné un gain d'azote très considérable, il n'était pas sans intérêt de 
les noter. 
La perte de cette fonction va exactement de pair avec le pouvoir que 
possèdent les mêmes formes de se contenter de peu d'oxjgèue pour leur 
croissance, c. à d. avec la perte de leur microaéropliilie, ce qui résulte 
aussi de leur culture en plein air. ') 
Pour des expériences sur la fixation d'azote, oii l'on se sert de Gra- 
uidohacter , ces remarques sont importantes: si l'on désire fixer beau- 
coup d'azote, il est recommaudable de se servir de cultures pures 
fraîchement isolées. A cet effet on doit introduire dans la solution 
nourricière du terreau jjasteurisé et le Chroucoccnm; au bout de 2 à 3 
jours on obtient une culture profuse de Granulohacter -(- Chruococcum. 
On inocule ensuite sur de l'agar au glucose, et les colonies aérobies de 
G ravulubacter ainsi obtenues, qui généralement s'éteadeut de tous côtés 
jusqu'à de grandes distances, sont immédiatement mises à profit pour 
les cultures combinées. Si l'on veut transporter le microbe sur un 
terrain solide dans des éprouvettes pour des cultures en séries, on fait 
bien d'y ajouter le Chroococcum, parce qu'on évite ainsi jusqu'à un cer- 
tain point la dégénérescence du Granulohacter , le Chroococcum diminuant 
la tension de l'oxygène en solution dans le milieu de culture. 
La haute pression de l'oxygène atmosphérique a pourtant une influence 
') On ne peut pas se servir ici du mot „anaéroLiose", puiscpi'il s'agit 
d'espèces t[ui se iaissuut furt bien cuitiver à i'air fibre. 
