Bruno Monterosso 
[Memoria XXII.] 
tornita, ove se ne eccettuino i risultati avuti dal prof. A. Russo (1907), dal Regaud e 
Dubreil (1905), Regaud e Policard (1901), dal Comes (1907) (1). 
L’epitelio della granulosa, come risulta dalle presenti ricerche, ha struttura e funzione 
d’ un organo glandulare, e come tale è un tessuto eminentemente variabile nella forma 
dei suoi elementi. La mancanza di fissità nella forma delle cellule secernenti, rende neces- 
sario non fermarsi soltanto allo aspetto che esse presentano nelle sezioni di pezzi trattati 
coi soliti metodi, tanto più che si tratta, nel caso presente, di sezioni d’ un tessuto 
formato da elementi per lo più di piccole dimensioni e fortemente stivati fra loro. È 
perciò che sono ricorso al metodo per dissociazione. 
II. Metodi di tecnica. 
Isolavo, appena macellato 1’ animale, i follicoli dal connettivo circostante, mediante un 
taglio di forbici, e nel tempo stesso li introducevo nel liquido fissatore. Per ottenere pre- 
parati per dissociazione, fra tutte le miscele adoperate, delle quali alcune da me stesso 
composte, trovai meglio adatta quella .consigliata dal Ranvier (1882), e denominata da lui 
alcool al terso. Feci però una modificazione, consistente nel diminuire il quantitativo 
d’acqua, o usando alcool 40 °/ 0 ovvero 35 % e protraendo la macerazione fino a venti ore, 
col quale metodo ho ottenuto preparati d’ una grande perfezione. Mi servii anche del meto- 
do adoperato dal Luna (191 1) per lo studio di altri epitelii, consistente in una soluzione 1 % 
di OsCL fatta agire a lungo; di quello indicato dal Loginoff ( 191 1), che immerge il pezzo 
in formalina e poi in alcool. Però con quest’ultimo trattamento le cellule dell’ epitelio follico- 
lare appariscono piuttosto opache, e i nuclei poco ben distinti. Il metodo dello Schaeppi (1907) 
m’ è stato utile per mettere in evidenza i granuli cellulari osmioriduttori. Tali metodi, se 
valgono per gl’inclusi citoplasmici, fissano male generalmente, la cellula. Ond’è che per 
conservarne bene la forma e mettere in evidenza i corpuscoli lipoidi, adoperai il seguente 
trattamento: Macerazione in alcool 36 % per 20-60 ore; immersione in Os0 4 a 0, 66 %, 
2-5 ore; lavaggio prolungato in H 2 0; dissociazione del pezzo in glicerina previamente me- 
scolata con qualche goccia di Verde di Metile o di Ematossilina Ehrlich. 
Dopo macerazione con alcool 35°, il colore che dà al preparato la maggior nitidezza 
ed eleganza è la Saffranina Pfìtzner. L’osservazione va fatta in acqua, mai in glicerina. 
Dirò infine d’avere avuto preparazioni nitidissime e rapide col seguente procedimento: 
macerazione in alcool 30% per 2-4 ore; colorazione nella miscela seguente: soluzione 
fisiologica Na CI 0, 75 %, Saffranina semi-alcoolica, Glicerina neutra purissima. 
Per avere dei termini di confronto e potere studiare i rapporti che hanno in sita le 
cellule della granulosa, mi sono avvalso di preparati ottenuti coi soliti metodi di fissazione 
(liquido Zenker, Benda, Flemming, Mueller, Hermann, Sublimato) e con colorazioni diver- 
sissime. Fra tali procedimenti però ho sempre trovato più eleganti i preparati di pezzi fis- 
sati col liquido Benda, colorati con Saffranina per 24 ore e differenziati in alcool de- 
bole acidulato. 
(i) C. ClACCIO (1910) infatti cosi dice: « In generale si ammette che dei materiali nutritizi passino 
dalle cellule follicolari alla cellula-ovo. Però non bisogna tacere che le ricerche speciali, istituite a questo 
scopo, non sono esaurienti ». 
