736 
1“. Schudt men de chlorofonii-oplossing met een weinig verdunde 
kali- of natronloog, dan gaat de kleurstof daarin over, terwijl de 
chloroform zich ontkleurt (oplossing H). 
2“. Voegt men thans een weinig zunr toe tot duidelijk zure 
reactie, dan ontkleurt zich de bovenstaande vloeistof weder, terwijl 
het pigment in de onderstaande chloroform overgaat. 
3". Voegt men aan de alkalische oplossing (zie sub 1".) een weinig 
salpeterigzunr houdend salpeterzuur toe, dan ontstaat het bekende 
kleurenspel der reactie van Gmelin. 
4°. Giet men op de alkalische oplossing voorzichtig een kleine 
hoeveelheid eener verdunde Jodiumoplossing in alcohol (1 ; J 00), dan 
ontstaat een blauwe ring. 
5“. Voegt men bij de alkalische oplossing, eei'st een gelijke hoe- 
veelheid alcohol, daarna deel der oorspronkelijke hoeveelheid 
van het diazo-mengsel van Ehklicii, dan ontstaat een roode kleur. 
Voegt men nu eenige druppels sterk zoutzuur toe, dan slaat de 
kleur naar blauw om. 
Al deze reacties bewijzen met elkander afdoende, dat het op de 
boven beschreven wijze afgescheiden pigment inderdaad bilirubine is. 
Men kan uit de zuivere chloroformoplossing (oplossing A) ge- 
makkelijk de kristallen van het bilirubine \ erkrijgen. Daartoe brengt 
men haar in een horlogeglas en plaatst dit, met een tweede horlogeglas 
bedekt, in de ijskast. De chloroform verdampt langzaam en op het 
horlogeglas blijven microscopisch zichtbare, fraaie, geel gekleurde 
bilirubine-kristallen over. Deze geven onder het microscoop bij 
toevoeging van salpeterigzunr houdend salpeterzuur de reactie van 
Gmelin te zien. 
Ook kan men de gele kristallen opnieuw in een of ander oplos- 
middel (chloroform, verdunde natronloog enz.) oplossen, en er de 
bovengenoemde reacties mede verrichten. 
Heeft men geen goede waterstraal-luchtpomp tot zijn beschikking, 
dan kan men de methode ook met de volgende (door Dr. Snapper 
aangegeven) wijziging nitvoeren : 
Men slaat 10 c.M.® bloedserum neer met 20 c.M.® aceton. Het 
eiwitneerslag wordt afgecentrifugeerd. Bij de' afgepipetteerde boven- 
staande vloeistof voegt men eenige druppels water; daarna wascht 
men deze vloeistof met aether eenige malen goed uit, om de vet- 
achtige stoffen zooveel mogelijk te verwijderen. Deze hoeveelheden 
aether worden telkens dooi' afpipetteeren verwijderd. Vervolgens 
voegt men eenige druppels ijsazijii en 1 c.Mh aether aan de vloeistof 
toe. Alle bilirubine gaat in het mengsel van ijsazijn en aether over, 
dat zich volledig van de daaronderstaande vloeistof afscheidt. Wanneer 
