LA CARRIÈRE ET LES TRAVAUX DE PASTEUR 333 
La virulence de ces cultures était telle qu'il suffisait 
d’en injecter aux poules une dose infinitésimale pour leur 
faire contracter la maladie et les tuer. Un hasard mit Pas- 
teur sur la voie d’une très importante découverte. Tant 
qu'on avait régulièrement repiqué, de vingt-quatre heures 
en vingt-quatre heures, les cultures du choléra des poules, 
le microbe était resté très virulent. Mais un jour, en 
utilisant pour l’inoculation des animaux une culture 
datant de quelques semaines, Pasteur constata que ceux- 
ci contractaient encore la maladie mais ne succombaient 
plus au mal. Et, chose du plus grand intérêt pratique, 
les poules ayant subi cette inoculation de culture vieillie 
étaient devenues réfractaires à l’inoculation de cultures 
régulièrement repiquées (virulentes) comme elles étaient 
devenues résistantes à la contagion naturelle : elles étaient 
immunisées. 
Immédiatement Pasteur se mit à l’œuvre pour obteiir 
le même résultat avec le charbon. 
En maintenant à l'étuve une culture de choléra des poules 
pendant un temps suffisamment long, il avait observé 
que sous l'influence du contact de l’air, la virulence de 
ce microbe s’atténue progressivement et qu'il arrive un 
moment où ces microbes sont devenus totalement aviru- 
lents et qu’ils ne tuent plus les animaux inoculés. 
Naturellement, il chercha à obtenir le même résultat 
avec les cultures de charbon, mais il se heurta ici à une 
difficulté qui rendit l’atténuation impossible. Au bout de 
quelques heures de séjour à l’étuve, les bacilles du char- 
bon sporulent, c’est-à-dire qu’une partie de leur proto- 
plasme, pour se soustraire aux influences nuisibles, passe 
tout en se densifiant de la vie végétative à la vie latente 
et ne subit plus aucune atténuation. 
Il fallait donc obtenir des cultures ne sporulant pas. 
Pasteur y réussit par un artifice très habile. Il suffit en 
effet de cultiver la bactéridie charbonneuse à la tempéra- 
ture de 42° à 43°: dans ces conditions, les bacilles se repro- 
duisent encore, mais sans former de spores. 
