Milzbrand. 
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Zeit haben dann die Bacillen die Fähigkeit der Sporenbilduug auch 
für normale Nährmedien verloren, sie sind aber noch virulent und 
können auf Meerschweinchen, Kaninchen und Schafe übertragen 
werden, ohne dabei die Befähigung zur Sporenbiidung wieder zu 
erlangen. 
Ein bequemes Verfahren zur Erzielung derartiger asporogener 
Kulturen ist nach Roux folgendes: 10 Proberöhren mit schwach 
alkalischer Kalbsbouillon erhalten abgestufte Zusätze von Karbol- 
säure, 2:10000, 4 : 10000 u. s. f. bis 20 : 10000. Eine 11. Proberöhre 
ohne Karbolsäure dient zur Kontrole. Alle werden im Autoklav 
bei 115° sterilisirt. Um Verluste an Karbolsäure während des 
Sterilisirens zu vermeiden, ist es gut, die Röhren oberhalb des 
Wattepfröpfchens zuzuschmelzen. Nach dem Erkalten werden alle 
mit einem Tröpfchen Blut eines kurz vorher an Milzbrand ver- 
endeten Thieres inficirt, wobei mau darauf achten muss, nichts 
von dem Blute an die Innenwand der Röhrchen zu bringen, damit 
nicht ein Theil der Einwirkung der Karbolsäure entgeht. Die 
Röhren bleiben bei 30—33° und müssen öfters umgesciiüttcit werden, 
um die Randbildung an der Oberfläche der Lösung zu verhindern, 
weil hier die Bacillen unter der Einwirkung des Sauerstoffs rasch 
Sporen bilden könnten. Nach 8 Tagen entnimmt man eine kleine 
Portion aus jeder Röhre, erwärmt den Rest auf 65° während 
15 Minuten (zur Tödtung der sporenfreien Stäbchen) und macht 
nun von jeder Röhre eine Aussaat in gewöhnliche Kalbsbouillon. 
Am folgenden Tage zeigt sich, dass die Kontrolröhre und die Ver- 
dünnung 2 : 10000 ein positives Resultat ergeben haben, die Röhren 
mit 4 : 10000 und 6 : 10000 zeigen oft an den folgenden Tagen noch 
Entwickelung, aber die übrigen bleiben meist steril, was beweist, 
dass hier keine Sporen vorhanden waren. Genau lässt sich die 
Grenze nicht angeben, weil dieselbe von der Beschaffenheit des 
Nährsubstrats, Art der Milzbrandkultur, Sauerstofl'zutritt zur Nähr- 
lösung u. s. w. abhängt. 
Aus einem angeführten Versuch geht hervor, dass die auf 
solche Weise erhaltenen asporogenen Milzbrandbacillen bei Passage 
durch mehr als 20 Meerschweinchen und 20 Kaninchen die Fähig- 
keit der Sporenbildung nicht mehr zurück gewannen. Dabei waren 
dieselben keineswegs abgeschwächt, tödteten Meerschweinchen in 
30 — 36 Stunden unter Bildung eines starken lokalen Milzbrand- 
oedems, Kaninchen in 48 — 60 Stunden. Die Virulenz soll sogar 
bei den Uebertragungen steigen. Aber Sporen wurden nicht ge- 
bildet, auch unter den günstigsten Bedingungen, bei starker Sauer- 
stoffeinwirkung, auch nicht in Humor aqueus. 
Die Wacbsthumsart der asporogenen Milzbrandbacillen in ver- 
schiedenen Nährmedien ist ziemlich die nämliche wie jene der 
sporenbildenden, doch scheinen sie die Gelatine langsamer zu ver- 
flüssigen. Mikroskopisch zeigen sich die Fäden kürzer und ent- 
halten oft glänzende Körnchen, die aber nicht die Widerstands- 
fähigkeit von Sporen gegen Erwärmung besitzen. In älteren Kul- 
turen werden die Fäden körnig und färben sich schlecht. 
In seinen Schlussbetrachtungen hebt Roux mit Recht die Be- 
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