Die im Schleimflusse lebender Bäume beobachteten Mikroorganismen. 637 
Böttcher’s feuchte Kammer, indem ich eine dünne Schicht von 
Würzegelatine (ca. 6# Gelatine in Bierwürze) mit den darin ver- 
theilten Zellen auf der nach unten gekehrten Seite des Deckglases 
anbrachte und dann mittelst eines Objektmarkirers diejenigen 
Zellen markirte, deren Lage eine solche war, dass sie für das un- 
bewaffnete Auge sichtbare Vegetationsflecken zu entwickeln im 
Staude waren, ohne mit anderen in der Nähe liegenden zusammen- 
zufliessen; kurz so, dass ich Sicherheit hatte, dass jeder der be- 
nutzten Flecken von einer einzigen Zelle gebildet war und folglich 
eine absolute Reinkultur enthielt. Wenn die auf solche Weise aus- 
gesäten Zellen jung und kräftig sind, bilden sie nach einem Tage bei 
25 0 C makroskopisch sichtbare Flecken. Diese sehen in diesem 
Stadium wesentlich wie gewöhnliche Hefeflecken aus. Mittelst einer 
schwachen Vergrösserung beobachtet haben sie aber ein mehliges 
Aussehen, und man sieht dann auch, dass sie von der Peripherie 
aus Strahlen in die umgebende Gelatine hinaussenden. Der grösste 
Theil besteht aus Ketten von Conidien, die sich leicht von einander 
trennen. Wenn ein Würzekolben mit einer solchen Reinkultur 
inficirt wird und dann in Thermostaten bei 25 — 27° C angebracht 
wird, tritt schon nach einem Tage eine deutliche Gährung hervor, 
und die ganze Oberfläche der Flüssigkeit wird zu derselben Zeit 
mit einer stark blasigen, mehlartigen, weisslichen Haut bedeckt, 
welche jedoch an einzelnen Stellen eine gelbliche oder bräunliche 
Farbe annehmen kann. Zwischen den Zellen findet sich eine deut- 
liche Einmischung von Luft vor. 
Wie in diesem Versuche wurde selbstverständlich auch in allen 
folgenden immer mit absoluten Reinkulturen gearbeitet. 
schon lange anerkannt worden, aber auch, wenn von der Darstellung einer Massen- 
kultur irgend eines Mikroorganismus für physiologische Experimente die Rede ist, 
ist das Princip an und für sich so einleuchtend, dass es kaum zu verstehen ist, dass 
man dennoch in den letzten Jahren Einwände dagegen gemacht hat. Oft habe ich 
während meiner Studien der verschiedenen Sprosspilze erfahren , welchen grossen 
Missverständnissen man ausgesetzt ist, wenn man zur Darstellung seiner Massen- 
kultur in den Kolben von solchen Vegetationsfleckeu in der Nährgelatine ausgeht, 
von welchen man nicht weiss, ob sie aus einer Zelle oder aus mehreren stammen. 
Ich habe deshalb seit 1882 dies mehrmals hervorgehoben. Meine Gegner räumen 
zwar ein, dass die von mir angegebene Methode genauer, als Koch ’s Plattenkultur- 
verfahren ist ; gewöhnlich ist man aber dazu geneigt , sich mit dem Gedanken zu 
beruhigen, dass man bei Anwendung der letzteren Methode nur in äusserst wenigen 
Fällen der Gefahr ausgesetzt sein werde, Flecken zu bekommen, von denen jeder aus 
mehreren und nicht aus einer einzigen Zelle gebildet ist. Die begangenen Fehler 
sind indessen grösser, als man geneigt ist anzunehmen. Genaue Aufschlüsse darüber 
sind in der nächsten Zeit von zwei verschiedenen Seiten, nämlich von Miquel in 
Paris und von Holm in Kopenhagen, zu erwarten. 
Dass das von Koch eingeführte Plattenkulturverfahren in technischer Rücksicht 
ein wichtiger Fortschritt ist, habe ich in meinen Schriften mehrmals hervorgehoben, 
es hat aber wie jedes Verfahren auch seine Grenzen. Eine andere Sache ist es, dass 
es bei den Bakterien in vielen Fällen wohl nicht möglich sein wird , sich den Aus- 
gangspunkt zu garantiren; bei den Sprosspilzen bietet dies aber für den geübten 
Mikroskopiker keine besonderen Schwierigkeiten, und folglich muss der strengen 
Forderung wenigstens hier Folge geleistet werden. 
Möglicherweise hat eben eine nicht vollständig garantirte Gelatinekultur dazu 
Veranlassung gegeben, dass Ludwig zu der unrichtigen Auffassung kam, dass eine 
genetische Verbindung zwischen den zwei Arten , mit welchen wir uns hier nament- 
lich beschäftigen werden, stattfände. 
