Auf kaltem Wege sterilisirte eiweisshaltige Nährböden nach R. Wollny. 31 
Aether entfernt, wodurch man zugleich die entfettete Milch völlig 
steril erhält. 
Die Herstellung des Milch nährbodens geschieht nun auf folgende 
Weise: 500 ccm frische Kuhmilch werden in einem verschliessbaren 
Scheidetrichter mit 1,0 Gramm Na OH = 0,2 Proz. (ich nehme 2,5 ccm 
einer Auflösung von 400 Gramm Na OH im Liter) versetzt, gut durch- 
geschüttelt und 48 Stunden bei einer Temperatur von ungefähr 18 0 C 
aufbewahrt. Während dieser Zeit hat sich das Fett als eine dicke 
Rahmschicht an der Oberfläche der Flüssigkeit gesammelt. Die unter 
der Rahmschicht befindliche, schon ziemlich durchsichtige Flüssigkeit 
wird nun in einen zweiten Scheidetrichter gebracht und zur Ent- 
fernung der letzten Spuren des Fettes mit 250 ccm Aether geschüttelt. 
Nach 48 Stunden hat sich der Aether von der klaren, nur bei auf- 
fallendem Lichte opalisirenden Flüssigkeit getrennt. Letztere ent- 
hält ausser den Milchbestandtheilen (Alkalikasein, Zucker und Salze) 
noch eine beträchtliche Menge Aether gelöst. Zur Entfernung des- 
selben wird die Flüssigkeit in einem geräumigen sterilisirten Koch- 
kolben, dessen Oeffnung mit Watte verschlossen wird, auf 50° C 
erwärmt und unter den Rezipienten einer Wasserstrahlluftpumpe ge- 
bracht, wo nach 8 bis 4 Stunden der Aether verdampft ist. — Um 
die so hergestellte sterile und fettfreie Milch, die als solche schon an 
Stelle von Bouillon als flüssiger Nährboden verwendet werden kann, 
zum Erstarren zu bringen, verfährt man auf folgende Weise: Zwei 
Theile dieser entfetteten Milch werden mit einem Theil einer 3 — 4-pro- 
zentigen sterilisirten Agarlösung 1 ) bei einer Temperatur von ca. 
50 0 C gemischt und in sterile Reagenzröhren vertheilt. Nach mehr- 
tägigem Aufenthalte im Brutschränke können die durch etwaige Luft- 
keime infizirten Röhreu ausgeschlossen werden, was übrigens bei sorg- 
fältigem Arbeiten nur bei 4 bis 5 Proz. der Röhren der Fall sein 
wird. Der auf diese Weise erhaltene Milchagar ist völlig durch- 
sichtig, hellgelb, bei auffallendem Lichte schwach opalisirend. — 
Anderseits kann man die fettfreie Milch direkt mit 1 x / 2 Proz. ge- 
pulvertem Agar versetzten, 24 Stunden bei Zimmertemperatur dige- 
riren, dann 2 — 3 Stunden im Dampftopf erhitzen und filtriren. Das 
Alkalikasein fällt beim Erhitzen nicht aus (erst beim Ansäuern des 
Nährbodens findet eine Fällung statt), jedoch wird der Nährboden in 
diesem Falle bedeutend dunkler gefärbt, da eine Karamelisirung des 
Milchzuckers eintritt und vielleicht auch das Kasein nicht ganz unver- 
ändert bleibt. 
Es dürfte daher der auf kaltem Wege hergestellte Nährboden 
eher zu empfehlen sein, zumal er trotz seiner Verdünnung mit Agar- 
lösung noch immer einen bedeutend höheren Nährwerth besitzt, als 
z. B. die gebräuchlichen Fleischwassernährböden. Denn während 
1) Es hat sich hier als vortheilhaft herausgestellt, Agarlösungen, namentlich konzen- 
trirtere, mit gepulvertem Agar (bezogen von R. M ü n k e , Berlin) zu bereiten, und 
zwar digeriren wir Agar mit dem betreffenden Lösungsmittel (Wasser oder Bouillon) 
24 Stunden bei Zimmertemperatur, setzen dann Eiweiss hinzu und kochen 3 — 4 
Stunden im Dampftopf. Auch konzentrirte Agarlösungeu filtriren dann schnell und klar. 
Entgegen der Meinung von N. K. Schultz in Band X. p. 60 dieses Centralblattes 
hat sich das Klaren des Agars mit Eiweiss bei meinen Versuchen sehr gut bewährt. 
