Ueber den Zellkern und die Sporen der Hefe. 
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schwierig ist. Ich machte das Hämatein haltbarer durch Kochen 
von Hämatoxylin in mit einem Tropfen Ammoniak versetztem Wasser 
und nachherigem vorsichtigen Ansäuern mit 2-proz. Essigsäure. 
Auch diese Lösung verlangt Vorbehandlung mit Pikrinsäure. 
Von den Anilinfarben in bekannter Anwendung zur Tinktion 
habe ich Ziehl’s Karbolfuchsin, Loeffler’s Methylenblau, die 
Gr am’ sehe Methode, ferner Lösungen des Gentiauaviolett in Kar- 
bol, Wasser, Glycerin, 1-proz. Essigsäure und 1-proz. Jodkalium be- 
nutzt. Alle diese färben gut fixirte und gehärtete Zellkerne gleich 
gut unter Benutzung dünner Farblösungen bis zum richtigen Grade 
der Anfärbung; oder, was leichter ist, nach Ueberfärbung mit stär- 
keren Farblösungen bei Erzielung richtiger Entfärbung (Differen- 
zirung). Karbolfuchsin und Karbolgentianaviolett, sowie Essigsäure- 
gentianaviolett habe ich auch heiss angewendet und mich überzeugt, 
dass vorsichtiges Aufkochen der Farblösung auf dem Deckglase der 
Kernfärbung keinen Eintrag thut. Im übrigen habe ich die Farblö- 
sungen stets kalt angewendet und vorzugsweise eine ziemlich dünne 
wässerige Gentianaviolettlösung, in welcher die Präparate nach 
15—30 Minuten Einwirkung genügend überfärbt waren zur nachfol- 
genden Dilferenzirung. 
Die Differenzirung ist der für eine gute Färbung wichtigste 
und schwierigste Theil derselben, und auch hier habe ich zur Er- 
zielung besserer Resultate mich erst nach einem neuen Differenzirungs- 
mittel umsehen müssen. Es zeigte sich nämlich, dass der Kern der 
Hefe den Farbstoff nur wenig fester hält, als das Protoplasma, so 
dass es sehr schwer gelang, den richtigen Grad der Entfärbung zu 
treffen. Es musste deshalb eine Flüssigkeit gesucht werden, welche 
weit weniger als die bisher üblichen Differenzirungsmittel (Alkohol, 
1-prozentige Essigsäure) den Farbstoff auszieht. Nur bei der Gram- 
schen Methode gelingt die Entfärbung durch Alkohol, weil vorher die 
die Farbe stark fixirende Jodlösung zur Anwendung gelangt; die 
Gram’sche Methode kann ich in Uebereinstimmung mit Schwarz 
zur Färbung pflanzlicher Zellkerne sehr empfehlen. 
Es ist bekannt, dass mit Anilinfarben hergestellte Präparate nicht 
in Glycerin aufbewahrt werden dürfen, weil dieselben dadurch nach 
einiger Zeit entfärbt werden. Gerade dieser Umstand veranlasste mich, 
das Glycerin als Entfärbungsmittel zu versuchen, und fand ich es zu 
diesem Zwecke ausgezeichnet brauchbar; nur wirkt das konzentrirte 
Glycerin schon häufig zu energisch und habe ich es deshalb mit dem 
gleichen Volumen Wasser, und selbst noch stärker verdünnen müssen. 
Sobald der richtige Grad der Differenzirung (meist nach wenigen 
Minuten) erreicht ist, wird das Deckglas in reinem Wasser gut ab- 
gespült und eingelegt. Schon aus den vorstehenden Angaben wird 
man ersehen können, wie schwierig in methodischer Hinsicht die Her- 
stellung gut gefärbter Kernpräparate bei der Hefe ist, und ich glaube 
auf Grund dieser Versuche bestimmt die Ansicht aussprechen zu 
können, dass die unrichtigen Resultate von Raum’s Untersuchung 
neben mangelhafter Fixirung und Härtung vorzugsweise ungenügender 
Differenzirung bei der Färbung zuzuschreiben sind. 
Einige Bemerkungen über zweckmässigste Aufbewahrungsart der 
