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tische Einschlüsse“ nennt 1 ), welche zwar bei Sprossung und 
Sporulation vorkämen, aber nicht regelmässig und nothwendig bei 
diesen Vorgäugen gefunden würden. 
Die Zellkernuntersuchung der Hefe war selbstverständlich auch 
auf die Sporen auszudehnen, um so mehr, da ja bei der Sporen- 
bildung nach dem Vorgänge bei Exoascusarten Karyokinese mög- 
licherweise zu erwarten war. In Betreff der Litteratur über die Sporen 
der Hefe verweise ich auf Jörgensen 2 ), wo das Nöthige zu finden 
ist. Ich habe die Sporenbildung bei der Bierhefe und den mit ihr 
häufig vergesellschafteten Hefespezies leicht dadurch erzielt, dass 
ich das mehrere Male mit Wasser gewaschene Hefenmaterial auf 
dem Deckglase im hängenden Wassertropfen vertheilte und auf die 
de Bary’sche feuchte Kammer legte. Nach 3—4 Tagen waren bei 
Zimmertemperatur stets die Sporen in grossen Mengen ausgebildet. 
Ich versuchte zunächst die Färbung der Sporen mit den oben 
genannten Farbungsmittelu in der Kälte; doch erhielt ich keine oder 
nur ganz vereinzelte Färbungen von kleineu Sporen (offenbar noch 
jugendlichen Stadien derselben). Die Anwendung der in meiner 
Sporenfärbungsmethode vorgeschlagenen 5-proz. Chromsäure ergab 
keine wesentliche Beschleunigung oder Verstärkung der Färbung. 
Die Anwendung einer 10-proz. Chromsäure Hess erst nach 3 Stunden 
die Sporen deutlich Farbe annehmen. Ohne vorhergehende Chrom- 
säurebehandlung, lediglich bei längerer Einwirkung (24 Stunden) des 
Farbstoffes, färbten sich dieselben sehr stark. Als Farblösung be- 
nutzte ich zu diesen Versuchen die ziemlich schnell und intensiv 
färbende Lösung von Gentianaviolett in 1-proz. Essigsäure; die Diffe- 
renzirung erfolgte mit konzentrirtem Glycerin. Sehr leicht und 
gut färben sich die Sporen beim Kochen mit Ziehl- 
scher Lösung und behalten den Farbstoff beim Ab- 
spülen in 4-proz. Schwefelsäure, so dass nachfolgende 
Doppelfärbung mit Hülfe grüner oder blauer Farb- 
stoffe möglich ist. Bei dieser Methode gelingt es aber fast nie, 
die Kernfärbung gleichzeitig zu erzielen; andererseits bleiben bei 
guter Kernfärbung die Sporen meistens ungefärbt. 
Aus der Gesammtheit der nach der einen oder anderen Art ge- 
färbten Sporenpräparate ergibt sich nun als erste auffällige Beob- 
achtung die Thatsache, dass die Sporen nicht simultan ausgebildet 
werden , wie es doch bei Ascosporen der Fall sein müsste , sondern 
nach einander und in sehr wechselnder Anzahl. Man findet am 
häufigsten zwei, dann eine Spore, weniger oft drei, und am wenigsten 
vier Sporen als die höchste Zahl, welche ich bei meinen Hefen bemerkt 
habe. Die succedane Ausbildung kanu beispielsweise bei drei Sporen 
so verlaufen, dass, während zwei Sporen bereits fertig ausgebildet 
sind , die dritte erst entsteht ; oder man findet alle drei in ver- 
schiedenen Altersstadien, was sich durch verschiedene Grösse ebenso 
wie durch verschiedene Färbung zu erkennen gibt. Bei vier Sporen 
pflegen entweder alle vier nach einander zu entstehen, oder in 
1) 1. c. p. 22. 
2) Die Mikroorganismen d. Gährungsindustrie. Berlin 1890. 
