Ueber die Kerne der Milzbrandsporen. 
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filtriert, das Filtrat aber wird mit einer Lösung von 30 g Pyrogallus- 
säure in 100 ccm destillierten Wassers gemischt. Zu dieser Mischung 
werden dann noch 250 ccm destilliertes Wasser, 100 ccm 85-proz. 
Spiritus und 50 g Glycerin hinzugefügt. 
Beim Studium der Arbeit Kolossow’s fiel mir ein, seine Me- 
thode zum Färben der Bakterien behufs Photographierens derselben 
anzuwenden. Zu gleicher Zeit hegte ich die Erwartung, diese Methode 
könnte zur Aufkläruug des Baues der Bewegungsorgane (Wimperhaare) 
der Bacillen und der Struktur der Bakterien selbst beitragen. Der 
Versuch ergab insofern negative Resultate, als sich die Bakterien 
entweder gar nicht oder doch nur so schwach färbten, daß man unter 
dem Mikroskope kaum ihre Umrisse unterscheiden konnte. Es war 
also nötig, die Intensität des Färbens zu erhöhen, und da ich den 
Mißerfolg zu erklären wünschte, bemühte ich mich, soweit es mir 
möglich erschien, einerseits die Eigenschaften der Ueberosmiumsäure 
an und für sich (behufs Begünstigung ihres Einsaugens in den Mi- 
krobenleib), und andererseits die Eigenschaften der Bestandteile der 
Kolossow’schen Reduktionsflüssigkeit (behufs Erhöhung der desoxy- 
dierenden Fähigkeit dieses Reagens) zu studieren. Die Aufklärung 
der bei dieser Färbemethode vor sich gehenden chemischen Prozesse, 
sowie auch experimentelle Untersuchungen ermöglichten es mir, den 
Grund des Mißerfolges zu finden. Es zeigte sich nämlich, daß die 
negativen Resultate beim Färben der Bakterien nach der Methode 
Kolos so w nicht davon abhängen, daß der „Entwickler“ die 0s0 4 
in dem von ihr durchtränkten Gewebe ungenügend reduziert, sondern 
davon, daß die 0s0 4 nicht in das Innere der Gewebe eindringt, da 
sie schon auf der Oberfläche der Bacillen zur Entstehung einer dichten, 
undurchdringlichen Hülle von Albuminaten der 0s0 4 Veranlassung 
giebt. Um die Bildung dieser Hülle zu verhindern, versuchte ich 0s0 4 - 
Lösungen verschiedener Konzentration verschiedene Quantitäten von 
Oxalsäure, Propionsäure, Milchsäure, Essigsäure, Salpetersäure u. dgl. 
hinzuzufügen; doch blieben die Resultate ebenso negativ wie früher. 
Positive Resultate erhielt ich erst dann, als ich der 1 / 2 - proz. 0s0 4 - 
Lösung Ameisensäure hinzufügte und das Präparat in dieser Lösung 
erwärmte; jetzt konnte ich die Mikroorganismen sogar in ein ge- 
sättigtes Schwarz färben. Das Studium der einzelnen Bestandteile 
der Kolossow’schen Reduktionsflüssigkeit sowie auch der Mischung 
selbst veranlaßte mich, dieser Flüssigkeit schwefligsaures Natron (in 
weiter unten angegebener Quantität) hinzuzufügen, wodurch die Energie 
der bei dieser Färbungsmethode entstehenden chemischen Prozesse be- 
deutend erhöht wird. 
Ich muß bemerken, daß ich die Kolo ssow’sche Flüssigkeit nie 
in großen Quantitäten bereitet habe, weil dieselbe durch Sauerstoff- 
aufnahme ihre ursprüngliche Fähigkeit, die 0s0 4 schnell zu reduzieren, 
in hohem Maße einbüßt. Es ist deshalb weit besser, diese Mischung 
in kleineren Quantitäten, aber öfter zuzubereiten. — Bei meinen Unter- 
suchungen bediente ich mich Kulturen von Bac. anthracis, die 
bei einer Temperatur von 37° in Glycerin - Agar - Agar gewachsen 
waren, nach 3— 4maliger (je einmal im Tage) Umimpfung. Nach 
vielen Versuchen, ein für die Mikrophotographie geeignetes, gefärbtes 
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