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B ey e rin ck , 
glaube ich, dass folgendes Verfahren zuerst von mir in Anwendung 
gebracht ist. 
Es beruht darauf, in einem undurchsichtigen Nährboden die für 
das Wachsthum schädliche Säure sofort nach der Entstehung zu 
binden und in ein lösliches, unschädliches Salz überzuführen, indem 
dabei ein unlöslicher Körper verschwindet, wodurch der Nährboden 
stellenweise durchsichtig wird. 
Mau verfährt dabei, wie folgt: 
Vermischt inan eine erstarrungsfähige, für Säureerzeugung ge- 
eignete Nährmasse mit sehr feiner, geschlemmter Kreide und giesst 
die gut gekochte Masse in eine sterilisirte Glasdose, so entsteht nach 
dem Erstarren ein Nährboden {lege, s. Figur), welcher gänzlich un- 
durchsichtig und milchweiss gefärbt ist. Je nach Wunsch und nach Um- 
ständen kann man für die Erstarrung Gelatine, Agar oder Kiesel- 
gallerte verwenden * 1 ). Bringt man darauf einen Tropfen irgend einer 
Säure, welche ein lösliches Kalksalz erzeugt, z. B. Milchsäure, so sieht 
man ein vollständig durchsichtiges Diffusionsfeld entstehen, welches 
sich so lange ausdehnt, bis die Säure nahezu 2 ) durch die Kreide 
neutralisirt ist, so dass die Mittellinie des circularen Feldes offenbar 
ein ungefähres Maass für die Quantität der verwendeten Säure ist. 
Enthält die Masse ausser Kreide auch noch die für das Wachs- 
thum der zu untersuchenden Organismen nothwendigen Nährstoffe, 
so können z. B. säurebildende Bakterienkolonieen darauf den näm- 
lichen Effekt hervorbringen, wie ein Tropfen freier Säure. Als Bei- 
spiel will ich das Verfahren angeben, um Milchsäurebakterien und 
Essigfermente in einer gährenden Maische nachzuweisen und zu 
isoliren. 
Die Erfahrung lehrt, dass diese Bakterien gut wachsen auf 
Hefewasser- Glukosegelatine und dass dieselben ihre Nährgelatiue 
nicht verflüssigen. Die Nährmasse wird nun derweise angefertigt, 
dass 20 g [Hefe in 100 ccm Leitungswasser gekocht, 8 g] Gelatine 
(oder 3 / 4 g Agar) und 5 bis 10 g Glukose zugesetzt werden. Nach 
neuem Kochen wird sorgfältig filtrirt und mau erhält eine vollständig 
durchsichtige, schwach gelbliche Masse, welche auch beim Erstarren 
glasklar bleibt. Daran werden nun einige Tropfen einer Auf- 
schlemmung reiner Kreide in Wasser gegeben bis zur gänzlichen 
Trübung, selbst in einer Schicht, welche ca. 1 mm dick ist. Nach 
Ausguss in eine Glasdose kann der Versuch anfangen. 
Hierzu wird ein Tropfen der rohen, gährenden Maische in ein 
Kölbchen mit gekochtem Wasser vertheilt und nach tüchtigem Um- 
schütteln wird dieses infizirte Wasser über den Kreideboden gegossen 
und sofort durch Augiessen entfernt. Es haftet dabei eine sehr 
dünne Wasserschicht an der Gelatineoberfläche, derweise, dass pro 
1 ccm Gelatine 3,3 emm Flüssigkeit als Benetzung zurückbleibt. 
Bald saugt die Gelatine (oder der Agar) das Benetzungswasser auf 
und die lebenden Keime bleiben an der Oberfläche zurück. 
1) Ucher den Gebrauch von Kieselgallerte für bakteriologische Zwecke werde ich 
bei einer anderen Gelegenheit berichten. (Zu vergl die inzwischen erschienene Ab- 
handlung von Winogradsky, Ann. d. l’Institut Pasteur. T. V. 1891. pag. 92.) 
i) Eine absolute Neutralisation findet nicht statt. 
