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J. Kuprianow, 
Karbolsäure zugesetzt, bis diese V 2 Proz. der Bouillon ausmachte. 
Darauf wurde die Bouillon so lange durch dasselbe doppelte Filter 
filtriert, bis das Filtrat klar war. Das Filtrat war dann nahezu 
bacillenfrei, die vereinzelten, mikroskopisch darin noch erkennbaren 
Bacillen waren abgetötet, wie die Kultur ergab. 
Einem Meerschweinchen von 180 g wurde 1 ccm dieses Filtrates 
eingespritzt. Nach 2 Tagen trat an der Impfstelle eine kleine 
Schwellung auf, die sich allmählich schärfer abgrenzte und nach 
2 Wochen nekrotisch abstieß. Während dieser Zeit war das Tier 
ganz munter, auch erfuhr es keine Abnahme seines Gewichtes. Das 
gewonnene Gift war mithin ein schwaches. 
Auf dieselbe Weise, wie das 2-monatliche Gift, habe ich solches 
von 4 Monaten erhalten. Das 4-monatliche war noch schwächer als 
das erstere, denn 2 ccm desselben waren nicht imstande, ein Meer- 
schweinchen von nur 150 g Gewicht zu töten, dieses zeigte sogar 
noch weniger Krankheitserscheinungen als das, welches 1 ccm 2-monat- 
lichen Giftes erhalten hatte. Das 6-monatliche Gift war noch schwächer, 
denn 5 ccm blieben bei einem Meerschweinchen nahezu ohne Ein- 
wirkung. 
Dann habe ich versucht, Gift in flüssigem, nach dem von mir 
im Centralblatt für Bakteriologie. Bd. XV. No. 13 beschriebenen Ver- 
fahren gewonnenem Blutserum zu erzielen. Nach 6- und 8-wöchent- 
licher Kultur im Brütapparate erzielte ich durch Filtration eine klare 
Flüssigkeit, welche in der Menge von 1 — 2 ccm Meerschweinchen von 
200 bezw. 280 g eingespritzt, an der Impfstelle ziemlich große An- 
schwellungen erzeugte, die nach 2 — 3 Wochen abgestoßen wurden. 
Die Tiere starben nicht. 
Da diese sehr schwachen Gifte zur Feststellung der Immuni- 
sierungskraft des Blutserums hoch immuner Tiere nicht brauchbar 
waren, habe ich auf Vorschlag von Prof. Loeffler weiter folgende 
Versuche gemacht, um starkes Gift zu gewinnen. Ich stellte mir 
Peptonbouillon von verschiedener Reaktion her. Die Bouillon wurde 
zuerst mit Kalilauge versetzt, bis ein Tropfen derselben auf Phenol- 
phtaleinpapier eine schwachrosa Färbung gab. Darauf wurde ver- 
schiedenen Proben dieser Bouillon Normalsalzsäure zugesetzt in der 
Menge von 10, 20, 30 und 40 ccm pro Liter. Auf diese Weise erhielt 
ich 5 Proben. Die erste, ohne Zusatz von Salzsäure, gab ziemlich 
starke alkalische Reaktion auf rotem Lakmuspapier, die zweite, mit 
10°/ 00 Normalsalzsäure, zeigte ganz neutrale Reaktion, die anderen 
3 Proben eine mehr oder weniger ausgesprochene saure Reaktion auf 
Lakmuspapier. 
Alle diese Proben wurden mit Diphtheriebacillen geimpft und in 
den Brütschrank gestellt. Nach Verlauf eines Tages zeigte die Probe 
mit Zusatz von 10 ccm Normalsalzsäure pro Liter das beste Wachstum, 
gutes Wachstum wiesen noch die Proben mit 20 ccm Salzsäure und 
ohne Zusatz von Salzsäure auf, bei denen mit 30 und 40 ccm Salz- 
säure war dagegen nur sehr schwaches Wachstum wahrzunehmen. 
Nach 2 Wochen wurde von dem Kolben mit 10 ccm Salzsäure ein 
kleiner Teil mit sterilisierter Pipette abgehoben, der nach Zusatz von 
Karbolsäure bis zu 0,5 Proz. filtriert wurde. Davon erhielt ein Meer- 
