184 van Wisselingh, Nachweis fies Gerbstoffes in der Pflanze etc. 
würde auch bei dem ersten Versuche Jodabscheidung stattgefunden 
haben und würde man sehr wahrscheinlich auch die beiden oben- 
genannten Farbreaktionen beobachtet haben. Ich bemerke hierbei 
noch, daß Spirogyren selbst gegen schwache Lösungen organischer 
Säure sehr empfindlich sind. In einer 0,1-proz. Lösung von Zitronen- 
säure, Weinsteinsäure, Apfelsäure oder Chininsäure gehen sie bald 
zu Grunde. Schon deswegen darf man nicht erwarten, daß Spiro- 
gyren freie Säure in einer einigermaßen bedeutenden Quantität 
enthalten. Wenn man die Spirogyrafäden in eine verdünnte Lösung 
von Kongorot bringt, nimmt die Zellwand Farbstoff auf und wird 
demzufolge rot gefärbt. Die Spirogyren bleiben dabei lebendig. 
Werden sie darauf durch schwache Erwärmung getötet, so darf 
man annehmen, daß eventuell im Zellsaft anwesende Säure die 
Zellwand passiert und die rote Farbe in eine blaue umwandelt. 
Dies findet aber nicht statt. Auf keinerlei Weise habe ich deshalb 
bei Spirogyra freie Säure nachweisen können. 
Wie sich unten zeigen wird, wird das verschiedene Verhältnis 
von Ammoniumkarbonat zu Gerbstofflösungen und dem Spirogyren - 
zellsaft durch die Anwesenheit von Salzen verursacht, welche 
die Fällung des Gerbstoffes durch Ammoniumkarbonat befördern. 
Wenn man eine 1-proz. Ammoniumkarbonatlösung mit einem 
gleichen Volumen einer 1-proz. Lösung von Tannin oder Spirogyra- 
gerbstoff mischt, so bildet sich kein Präzipitat, oder es findet erst 
nach längerer Zeit eine Fällung statt. Enthält die Tanninlösung 
aber 0,1 Proz. Kalzinmchlorid (CaClj), 1 Proz. kristallisiertes Mag- 
nesiumsulfat (Mg S0 4 , 7 H 2 0), 1 Proz. kristallisiertes Magnesium- 
chlorid (Mg Cl 2 , 6 H 2 0), 1 Proz. Kaliumchlorid (K CI), 1 Proz. 
Kaliumnitrat (KN0 3 ), 5 Proz. oder 2 Proz. Natriumchlorid (Na CI), 
so entsteht sofort ein Präzipitat, das in einigen Fällen, besonders 
bei Anwesenheit von Kalziumchlorid, sehr bedeutend ist. Die 
Quantitäten der Kalzium- und Magnesiumsalze in den benutzten 
Lösungen sind so, daß bei Mischung mit der Ammoniumkarbonat- 
lösung keine Fällung stattfindet. 
Vermischte ich 50 cM 3 2-proz. Tanninlösung mit 50 cM 3 
Knopp scher Nahrungsflüssigkeit und fügte ich zu diesem klaren 
Gemisch eine gleiche Quantität einer 1-proz. Ammoniumkarbonat- 
lösung hinzu, so trat ein Präzipitat auf. Löste ich in dem Graben- 
wasser, worin die Spirogyren kultiviert wurden, 1 Proz. Tannin 
und vermischte ich daun die klare Lösung mit einer gleichen Quan- 
tität 1-proz. Ammoniumkarbonatlösung, so wurde das Gemisch sofort 
sehr trübe. 
Es versteht sich, daß in dem Grabenwasser, worin die Spiro- 
gyren wachsen, und in ihrem Zellsaft Salze Vorkommen und diese 
Salze, wie aus obigem hervorgeht, die Fällung des Gerbstoffes durch 
Ammoniumkarbonat befördern müssen. 
Methoden der physiologischen Untersuchung. 
Altere Methoden. Die Methoden, die man bis jetzt bei 
höheren Pflanzen bei Untersuchungen über die physiologische Be- 
