Deber die Verwendung des Harnagar zur Züchtung des Diphtheriebacillus. 661 
ein Wachstum, das recht verschieden ist von den tröpfchenförmigen 
Kolonieen, wie man sie auf Serumnährböden zu finden gewohnt ist. 
Bloß selten findet man diesen ähnliche, weiße Kolonieen, meist aber 
nebst diesen oder auch allein viel größere (bis zu 7 mm im Durch- 
messer) ziemlich dicke, aber flache, weißgraue Kolonieen mit unregel- 
mäßigen Konturen, die in der Regel recht trocken aussehen und 
sich dadurch schon auf den ersten Blick von etwa ähnlich wachsen- 
den Beimengungen unterscheiden. Sie sind manchmal recht zahlreich, 
seltener spärlich. In einem Falle habe ich bloß 7 massige derartige 
Kolonieen in einer Petri’ sehen Schale gefunden (Abspülung mit 
Borsäure war unterlassen worden). Unter dem Mikroskop erscheinen 
sie dunkelbraun, feingranuliert und meist von radiären Furchen durch- 
setzt, deren einigen entsprechend der Rand stellenweise tief einge- 
buchtet ist; das Centrum erscheint fast schwarz und manchmal von 
etlichen hellen Flecken durchsetzt. 
In anderen Fällen, vornehmlich dann, wenn Beimengungen spärlich 
sind oder fehlen, breitet sich ein auffallend üppiger Rasen, grauweiß 
oder grau und etwas höckerig, über die Impfstriche aus. 
In Bezug auf die Technik des Ausstreichens auf Harnagar möchte 
ich hervorheben, daß ich ein festes Aufdrücken der Membranteile 
auf den Nährboden für nötig halte. Dieser wird hierbei nicht ver- 
letzt, wenn man nicht zu wenig davon (also mindestens 10, besser 
15 ccm) in eine Petri ’sche Schale vom Durchmesser von etwa 9 cm 
gegossen und hierauf noch 1 — 2 Tage im Brutofen belassen hat. Die 
längere Abspülung der Partikel in 2-proz. Borsäure ist, wenn nicht 
unerläßlich, doch sehr förderlich, weil allzureichliche Beimengungen 
das Wachstum des Diphtheriebacillus beeinträchtigen. 
Die Reinzüchtung gelingt auf Harnagar fast stets in der zweiten 
oder dritten Generation. In einem einzigen Falle, und da war die 
Abspülung mit Borsäure unterlassen worden, gelang sie nicht. Durch 
einen Coccus, der offenbar identisch ist mit dem Micrococcusy 
Barbier’s x ), war die zweite Generation des Diphtheriebacillus 
vollständig überwuchert. Das angeschlossene Plattenverfahren blieb 
erfolglos. Mir ist dieser Coccus, der, wie dies Barbier von 
seinem M i c r o c o c c u s y angiebt, dem Diphtheriebacillus ähn- 
liche Kolonieen zeigt, als häufige Beimengung bei Diphtherie aufge- 
stoßen. Ich habe aber seine Kolonieen bei mikroskopischer Unter- 
suchung immer dadurch als solche erkennen können , daß sie zarter 
und heller gefärbt sind und daß sie häufig nur einen sehr kleinen, 
meist aber gar keinen Kern aufwiesen. 
Um sicher zu sein, daß die auf Harnagar reingezüchteten Diph- 
theriebacillen keinen Verlust an ihrer Virulenz gegenüber dem Serum 
erleiden, habe ich gleiche Gewichtsteile (0,0265 gr) von Kulturen, 
die auf Harnagar und auf Loeffler ’schem Serum rein gezüchtet 
waren, in je 1,5 ccm sterilen Wassers aufgeschwemmt. 
Von der Aufschwemmung mit der Serumkultur wurden injiziert: 
0,4 ccm einem Meerschweinchen von 368 g, 
0,8 ccm „ „ - „ 460 g, 
1) Centralblatt für Bakteriologie und Parasitenkunde. 1892. p. 383. (Ref.) 
