169 
Dass eine Autolyse der Azotobacterzellen nicht 
eingetreten ist, muss in dem Versuche entweder darauf 
beruhen, dass der Nahrungs Vorrat nicht ausgenutzt 
worden ist und die Konzentration bakterizider Stoffe 
nicht die genügende Höhe erreicht hat, oder darauf, 
dass solche autolytisch wirkende Stoffe überhaupt nicht 
gebildet werden. — Ein Versuch, die erstere Möglichkeit 
zu prüfen, wurde in der Weise ausgeführt, dass 20 ccm 
vom Kulturfiltrat mit einer jungen (3 Tage) auf Mannit- 
Agar gezüchteten Azotobacterkultur geimpft wurden. 
Ein üppiges Wachstum zeigte sofort, dass der Mannit 
nicht erschöpft war, und es war somit unmöglich, zu 
entscheiden, ob die Bakterien überhaupt Toxine gebildet 
hatten. Da es sich herausgestellt, hatte dass 1. keine Spal- 
tung des Bakterieneiweisses in wasserlöslichen Bestand- 
teilen vorlag, und 2. dass unter den gegebenen Bedingungen 
keine genügende Ansammelung entwickelungshemmender 
Produkte vorhanden war, musste man, um eine Autolyse 
eventuell nachzuweisen, dem Azotobacter die Nahrung 
schmälern. 
Es wurden zu diesem Zwecke zwei grössere Por- 
tionen Azotobacter chroococcum, die eine eine Rohkultur, 
die andere eine aus dieser isolierte Reinkultur, durch 
Zentrifugierung ausgewaschen. Die physiologische Koch- 
salzlösung (0,8 Proz. NaCl), die als Waschwasser diente, 
wurde zwei Mal gewechselt. Durch die Zentrifugiering 
(5 Minuten à 3,000 Drehungen) entfernte man so. 
weit möglich alle löslichen Bestandteile aus den Bakte- 
rienmassen, die nachher in je eine Beijerinck’sche 
Mannitlösung (100 ccm.) übergeführt wurden, welche 
nur 0,2 Proz. Mannit enthielten. Die Kulturen blieben 
vom 20. XII. 1914 bis zum 1. II. 1915 im Thermostaten 
(bei 28° Cel.) stehen. 
In der Reinkultur bilden die Bakterien auf den 
Boden des Gefässes eine tiefschwarze Schicht, während 
die Flüssigkeit vollständig wasserklar ist. Die Rohkul- 
