Zur Untersuchungstechnik der Hyphomyceten. 
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Bei der Beobachtung der Aufeinanderfolge der Zellen während der 
Sporenbildung, bei Entscheidung der oft schwierigen Frage, ob mehrere 
gefundene Fruchtbildungen wirklich demselben Pilze zukommen oder 
nicht und aus welchen Theilen und wie sie sich bilden, sind diese „Mini- 
malkulturen“ allen anderen Kulturarten nach meiner Ansicht überlegen. 
Denn siegarantiren in dereinfachstenWeiseauf Wochen 
und Monate hinaus die Reinheit der Kultur ohne in 
einem Moment die Beobachtung einer bestimmten 
Stelle unmöglich zu machen. Unbedeckte Objektträgerkulturen 
sind niemals so lange rein zu halten, und mit dem Deckglas zer- 
stören wir fast immer den Zusammenhang irgend welcher wichtigen 
Theile des in die Höhe wachsenden Pilzrasens. 
Wo starke Lichtbrechung und Thautröpfchen an den Pilzen die 
Beobachtung durch die Glaswand erschweren und die Kultur fixirt 
werden darf, fülle ich das Reagirglas mit einer ziemlich stark licht- 
brechenden, Spiritus-, ammoniak- und glycerinhaltigen, dünnen Gelatine- 
lösung 1 ). Dieselbe benetzt die Pilze, vertreibt die Luftblasen, macht 
die Minimalkultur vollkommen durchsichtig und verwandelt sie zu- 
gleich in eine Dauerkultur. 
Man kann endlich der Aufhellung und Fixirung noch eine Fär- 
bung der Minimalkultur in situ vorausschicken, indem man das Reagir- 
glas mit der spirituös-wässrigen, starken Lösung einer basischen Anilin- 
farbe füllt, die Lösung beliebig lange darin lässt, die gefärbte Kultur 
dann mit verdünntem Spiritus nachwäscht und schliesslich durch 
Füllung des Glases mit Kochsalzlösung oder Kali aceticum die ge- 
färbte Dauerkultur vollendet. Hat man eine Abspülung mit Alkohol 
vorausgeschickt, so kann man die Aufhellung und Fixation der Kulturen 
auch durch Auffüllen des Glases mit gereinigtem Petroleum sehr ein- 
fach bewerkstelligen. Die manchmal störende Fluorescenz des Petro- 
leums benimmt man demselben durch Zusatz einiger Tropfen Nitro- 
benzols 2 ). Bei letzterem Füllungsmittel wird das Reagirglas verkorkt, 
bei Salzlösungen eventuell auch mit der Gummikappe bedeckt. 
Hat man es bei diesen Operationen mit Pilzen zu thun, welche 
bei jeder Berührung sofort mit Abwerfen der Sporen antworten, so 
muss es die erste Sorge sein, ohne jede Erschütterung etwas ab- 
soluten Alkohol in das Glas fliessen zu lassen und dasselbe zu ver- 
korken. Der Alkohol dringt allmählich in die Kulturen ein und 
fixirt die Sporen, so dass man sie nachher mit Bequemlichkeit auf- 
hellen und färben kann. 
Wenn auch überall, wo es sich um genaueres Studium der 
Fruchtbildung handelt, die Minimalkulturen den gewöhnlichen Objekt- 
trägerkulturen vorzuziehen sind, so wird man doch in vielen Fällen 
auch auf diese zu recurriren haben, speziell wenn es sich um Fragen 
der Auskeimung und Hyphenbildung handelt. Da ist es nun manch- 
mal erwünscht, statt eines Zupfpräparates die ganze Objektträger- 
kultur in toto gefärbt zu untersuchen. Wenn bei der Färbung der 
Minimalkulturen das Minimum von Nährboden als störender Faktor 
1) Gelatine 1. Spiritus, Liq. Ammon, caust. aa. 25,0. Glycerin 15,0, Aq. destill. 35,0. M. 
2) Nach einem mir freundlichst von Herrn Dr. E. Jacobsen ertheilten Käthe. 
