Pastor, Zur Gewinnung Von Reinkulturen der Tuberkelbacillen aus dem Sputum. 233 
Eine Methode zur Gewinnung von Reinkulturen der 
Tuberkelbacillen aus dem Sputum, 
Von 
Dr. E. Pastor, 
Prosektor am Alexander-Hospital in St. Petersburg. 
Seit der Entdeckung des Tuberkelbacillus ist in seinem Kultur- 
verfahren, ausser einem Zusatz von Glycerin (Roux und Nocard) 
zu den Nährmedien nichts wesentlich Neues zu verzeichnen. Was 
dagegen die Herstellung von Reinkulturen anbetrifft, so halten sich 
bisher noch alle Bakteriologen streng an das ursprüngliche Verfahren 
von R. Koch, weil es sich für das einzig sichere bewährt hat. 
Wie bekannt, nimmt diese Methode sehr viel Zeit in Anspruch und 
ist das positive Resultat wesentlich abhängig von bacillenreichem und 
ganz frischem Tuberkelmaterial, wie es uns die Impftuberculose der 
Thiere liefert. Dagegen konnte bisher das reiche Material, welches 
uns die Klinik und der Sektionstisch bietet (Sputum, Kavernen- 
inhalt), nach diesem Verfahren , aus bekannten Gründen, zu Rein- 
kulturen nicht verwerthet werden. 
Vor 3 Jahren hatte ich gelegentlich eines Studiums der Rein- 
kulturen von Tuberkelbacillen verschiedener Herkunft ein Verfahren 
angewandt, nach welchem es mir wiederholt gelungen ist, Reinkulturen 
direkt aus dem Sputum und dem Inhalte phthisischer Kavernen zu 
erhalten. Das Prinzip dieses Verfahrens beruht auf der Plattenkultur 
und ist kurzweg folgendes: 
Nachdem man sich durch die mikroskopische Untersuchung 
überzeugt hat , dass das Sputum sehr bacillenreich ist und verhält- 
nissmässig nur geringe Verunreinigungen mit anderen Mikroorganismen 
aufweist, lässt man den Patienten wiederholt die Mund- und Rachen- 
höhle mit sterilisirtem Wasser ausspülen und darauf in ein sterilisirtes 
Reagenzglas expektoriren. Das so gewonnene Sputum wird durch 
Aufschütteln mit sterilisirtem Wasser fein emulgirt und alsdann zur 
Entfernung von gröberen Partikeln durch feine Gaze filtrirt. Von 
dem fast undurchsichtigen bacillenreichen Filtrat werden einige 
Tropfen mit flüssiger 10% Nährgelatine vermischt, jedoch so, dass 
die Nährflüssigkeit dadurch nicht sehr getrübt wird. Es genügt, 
eben nur so viel vom Filtrat hinzuzufügen, dass in jedem aus der 
Mischung hergestellten Trockenpräparate noch vereinzelte Bacillen 
vorhanden sind. Die noch flüssige Nährgelatine wird darauf auf 
Platten ausgegossen, die bei Stubentemperatur unter Glasglocken- 
verschluss belassen werden. Nach Verlauf von 3 — 4 Tagen treten 
die verschiedenartigen Kolonieen der das Sputum verunreinigenden 
Bakterien auf. Mit der Lupe werden nun die zwischen den Kolonieen 
klar gebliebenen Stellen (der Gelatine) aufgesucht, vorsichtig mit 
einem desinfizirten Messer herausgeschnitten und auf die schräg er- 
starrte Oberfläche des Blutserums gebracht. Von 10 auf solche 
Weise geimpften Blutserum-Röhrchen erhielt ich stets in einem, 
seltener in einigen (2—4) Reinkulturen von Tubcrkelbacillcn. Die 
