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F o t h 
die dem Tode nahe waren, habe ich in mehreren Fällen sofort wieder 
sehr virulente Kulturen erhalten. 
Es ist das der Grund, weshalb ich versucht habe, den Werth 
der Färbung in der in Rede stehenden Richtung gerade an den 
Tetanussporen zu prüfen. 
M. gibt an , dass diese Sporen sich nach 2 Min. Chromsäure 
sehr schön färben, dass jedoch die Bacillen die Gegenfarbe nicht 
mehr annehmen, und greift hier deshalb wieder auf das Chlorzinkjod 
zurück. Die Tetanussporen färben sich aber auch aus den giftigsten 
Kulturen schon ohne je d-e Beizung, wenn man sie mit der Farb- 
lösung auf dem Deckglase direkt über der Flamme unter stetem Nach- 
tröpfeln von Farblösung etwas länger, also einige Minuten, färbt. 
Um dennoch die Mazeration verwenden zu können, liess ich die 
vorbehandelten Deckgläser im Uhrschälchen auf der heissen Farb- 
flotte schwimmen. Dauer der Färbung 60 Sekunden; Farbbeize 
Anilin. Dann Ent- und Gegenfärbung. In dieser Weise färben sich 
die meisten Sporen gar nicht, und nur wenige sind etwas ange- 
färbt. Nach bestimmt langer Einwirkung von Chromsäure gelang 
dann die Färbung, und auch die Gegenfarbe wurde leidlich ange- 
nommen. Erheblich besser wurdeu die Bilder bei Verwendung von 
H 2 0 2 . Beide Präparate wurden stets neben einander benutzt. 
Zur Untersuchung kamen zunächst eine grosse Anzahl verschie- 
dener, zum Theil recht alter Kulturen in Agar und Gelatine, die in 
einem kühlen, dunklen Raume aufbewahrt waren. Von diesen aus 
wurden jüngere Kulturen in 1 Proz. Agar (mit Zusatz von araeisen- 
saurem oder indigsulfosaurem Na), in Zuckergelatine uud in frischer 
Rindsbouillon unter H gewonnen, die brutbeständigen l 1 / 2 — 2 Wochen 
bei 38° gehalten und dann alles gegen Austrocknung geschützt im 
kühlen, dunklen Raume aufbewahrt. 
Um die Sporen aus 23 Agar-, 10 Gelatine- und 12 unter H 
gewachsener Bouillonkulturen zu färben, bedurfte es einer Chrom- 
säurebeizung von 1 — 2 Min. Dabei färben sich die sporentragenden 
Bacillen entsprechend schlechter in der Gegenfarbe. Dieser Uebel- 
stand wurde vermieden, wenn ich 10-faches Wasserstoffdioxyd 4—6 
Min. lang einwirken liess. Die Sporen aus den verschiedenen, sämmt- 
lich sehr virulenten Kulturen zeigten also erhebliche, und zwar vom 
Alter der Kultur unabhängige Differenzen. War dies ein Ausdruck 
verschiedener Resistenz überhaupt, so musste ein gleiches auch auf 
künstlichem Wege erreicht werden können. Ich liess demnach ver- 
schieden lange Zeit hindurch höhere Temperaturen auf einzelne Kul- 
turen einwirken und verglich die Färbungsresultate : 
1. Dez. 91. Agarkultur vom 1. Nov. enthält fast nur die bekann- 
ten kochlöffelförmigen Formen und sehr stark wirkendes Toxin. Eine 
Platinspitze voll tödtet eine weisse Maus in 45 Stunden tetanisch. 
Sporenfärbung: 2 Min. Chromsäure, 6 Min. R 2 0 2 , 4 — 5 Min. 
Chromsäure werden noch ohne nennenswerthe Umfärbung vertragen. 
Kultur l 1 / 2 Stunden bei 80° im Wasserbade: Färbung unver- 
ändert. Davon Kulturen in Agar bei 38°. Sporen hiervon dieselbe 
Färbung. Von diesen Tochterkulturen am 5. Dez. 91 Bouillonkulturen 
unter Wasserstoff: Sporenlarbupg wie vorhin. Eine dieser Bouillon- 
