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ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUK 
Pour l’emploi, on liquéfie le milieu dans l’eau bouillante et 
ensuite on met les tubes au thermostat à 42°. Lorsque les tubes- 
ont pris cette température, on verse dans chacun d’eux 1 c. c. 
de sérum de lapin ou de cheval, préalablement chauffé à 
5o° pendant 20 minutes, puis on ensemence la matière à 
examiner. Du premier tube on ensemence le deuxième, de celui- 
ci le troisième et quelquefois de ce dernier un quatrième, pour 
avoir des colonies suffisamment isolées. 
Après avoir fait tous les ensemencements, on verse la 
gélose de chaque tube dans la moitié la plus large d’une boîte 
de Pétri et on la recouvre de la seconde moitié, en tournant 
en haut l’ouverture de celle-ci; ainsi le milieu est compris et 
pressé entre deux surfaces de verre parfaitement stériles. 
Nous recommandons, pour plus de commodité, de stériliser 
les boîtes de Pétri en déposant les deux moitiés dans le rapport 
où elles doivent se trouver après l’introduction de la gélose 
milieu 
de culiwe 
entre elles. On n’a ainsi qu’à soulever la partie supérieure et 
on évite toute souillure des faces qui doivent rentrer en contact 
avec le milieu de culture. Pour éviter toute contamination par 
l’air extérieur, on recouvre le tout par une plaque plus grande 
qui est stérilisée en même temps que les plaques sous-jacentes^ 
On laisse 3 à 4 jours les boîtes à l’étuve pour permettre à 
tous les anaérobies de se développer et pour faire disparaître 
l’eau de condensation que pourrait contaminer les colonies 
pures. 
11 va sans dire que le développement d’un certain nombre 
d’anaérobies, qu’on voit commencer après 18 à 24 heures, peut 
être observé à l’œil nu ou au microscope. 
Pour le prélèvement des colonies, on détache doucement les 
deux surfaces de verre Tune de l’autre, de façon que la lame de- 
gélose reste adhérente à Tune ou l’autre d’entre elles, et on 
pêche les colonies avec une pipette de verre effilée à son 
extrémité. 
Au fur et à mesure qu’on isole les colonies pour les mettre 
