IIÉMOLYSINES iNATlIRELLES 
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nisines dans la lièvre récurrente d’après le degré d'hémolyse obtenue, mul- 
tiplié par le degré de dilution des sérums employés. 
Toutes ces méthodes donnent des valeurs qu’on ne peut pas comparer 
entre elles. 
MbyriiODK PKHSONNKl.LK ‘ 
Le dosage de la ([uantité totale d’hémoglobine mise en liberté par une 
quantité donnée de sérum est la seule manière qui nous permet de calculer 
exactement la richesse de ce sérum en hémolysine. Mais il faut prendre une 
série de précautions sans lesquelles les résultats ne restent pas constants et 
comparables. Des essais très nombreux m’ont montré qu il est nécessaire 
d’observer les règles suivantes : 
A une quantité donnée de liquide hémolytique on a joute une égale quan- 
tité de réactif globulaire-. On place les éprouvettes à l’étuve, ù la tempéra- 
ture de 37o-38o et on les agile pendant toute la durée de l’expérience. Il n’est 
pas indifférent de laisser les é[)rouvettes tranquilles ou de les ngiter; car. eu 
agitant, on évite que les globules se déposent au fond de I éprouvette, et on 
maintient le mélange uniforme. 
Les éprouvettes sont maintenues à l’étuve pendant 45' à tiO'. On centrifuge 
ensuite le mélange, on décante le liquide (|ui renferme en solution 1 hémo- 
globine et on dose celle-ci au moyen de riiémomètre de Fleisch-Miescher. 
Si l’échantillon du liquide qu’on examine a une intensité de couleur supé- 
rieure au maximum de l’échelle Fleisch, il faut naturellement le diluer. 
La chambre de l’appareil Fleisch aune capacité de 1 c. c. 5; nous avons 
donc immédiatement un chiffre qui nous représenteen unitésclel hémomètre 
la (juantité d’hémoglobine qui se trouve dans 4 c. c. 5 de noti*e échantillon. 
Au moyen d’un calcul assez simple, j’ai établi un rapport entre l’échelle 
cob)rimétrique de l'appareil de Fleisch et laifuantité totale, en poids, d’oxy- 
hémoglobine dissoute. En elîet, 1 mgr. d’oxyhémoglobine dissoute en 1 c. c.5 
d’eau distillée (capacité de la chambre de l appareil Fleisch) donne une colo- 
ration correspondant au chiffre 105 de l’échelle colorimélrique. Il suffit donc 
dediviserpar 1051e nombre des unités obtenues à riiémomètre pour avoir 
la quantité d’hémoglobine en miHigrammes. En connaissant ainsi la quantité 
d’hémoglobine contenue dans 1 c. c. 5 de liijuide, il ne reste plus (pi’à calcu- 
J. ün résumé do cette méthode a formé le sujet de la note suivante : 
G. Mioxi, Dos'age du pouvoir hémolyti(|ue, Comptes rendus de la Soc. de Bio- 
logie. 1904, X, t. LVl. p. 167. 
±. Préparation du réactif globulaire: 
On extraitau moyen d’une canule introduite dans une artère de l’animal une 
quantité donnée de sang, et on le défibrine par un battage peu énergiiiue. Ge 
sang est lavé deux fois avec une solution isotonique de Cl Na (10 fois son volume) 
en centrifugeant; après la dei-nière centrifugation on rarnèm' le dépôt globulaire 
au volume primitif du sang, en ajoutant la solution de Cl Na. Ce réactif est com- 
posé, à peu près, comme le sang normal, de 60 0 0 de pai'tie liquide et de 40 0 0 
de globules. 
Le réactif globulaire doit être aussi récent «{ue possible'; les animaux qui le 
fournissent doivent être absolument sains. Les globules, en vieillissant en dehors 
«le l’organismt', deviennent plus fragiles et, lorsqu’on a une série d’expériences à 
faire, il est néct'ssaire que le facteui- de leui- résistance soit toujours le même. 
