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ANNALES DE L’INSïlïUT PASTEUR 
de ne leur donner, quelque temps avant Topération, qu’une 
nourriture sèche. 
La culture du botulisme qui servait pour nos expériences 
provenait de la collection de l’Institut Pasteur L 
Nous préparions la toxine de la façon suivante : le bouillon 
de porc (oOO grammes de viande de porc pour 1 litre d’eau, 
auquel on ajoute 1 0/0 de peptone, 1 0/0 de glucose et 1/2 0/0 de 
sel) était distribué dans des ballons à long col; dans chaque 
ballon on introduit un peu de carbonate de chaux pur qui, bien 
entendu, se précipite au fond, puis on verse sur la surface une 
petite couche de vaseline liquide, on bouche avec de la ouate 
et enfin on stérilise le tout dans l’autoclave à 100® pendant une 
demi-heure, 3 fois, à 24 heures d’intervalle. Dans des ballons 
ainsi préparés et refroidis, on ensemence le bacille et on laisse à 
une température d’environ 20® pendant 2-3-4 semaines; après 
quoi bn filtre sur bougie Chamberland. 
La toxine obtenue de cette façon tuait un cobaye de 300 à 
500 grammes à la dose moyenne de 0 c.c. 001 sous la peau 
(certaines toxines étaient plus faibles — 0 c.c. 01, d’autres — plus 
fortes — 0 c.c. 0001 et même 0 c.c. 00005). 
Pour le lapin, par injection sous-cutanée, la dose mortelle 
était en moyenne 0 c.c. 001 (quelquefois 0 c.c. 0001.) 
Pour tuer un lapin avec delà toxine introduite par la bouche, 
il faut des doses beaucoup plus fortes ; en moyenne environ 
5 c.c. (rarement 10 c.c.) parfois seulement 3 c.c. Comme on le 
voit, si on compare avec les doses mortelles sous-cutanées, il 
faut alors des quantités énormes de poison. 
Dans nos expériences d’immunisation par l’intestin, nous 
commencions d’ordinaire avec de petites doses; que nous augmen- 
tions peu à peu. Disons tout de suite que ces expériences présen- 
taient des difficultés considérables. Celles-ci peuvent être divi- 
sées en deux catégories. Premièrement, des difficultés d’ordre 
général venant de ce qu’il n’est pas facile de conserver les 
lapins durant une assez longue période de temps. La moitié, 
sinon davantage, est contaminée par quelque infection étran- 
gère et périt avant qu’on ait pu obtenir quelques résultats. 
Deuxièmement, des difficultés dépendant de la très grande 
sensibilité des lapins relativement à la toxine botulique. 
1. L’Institut l’avait reçue de van Ennengem. 
