506 
ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUR 
II 
TECHNIQUE 
Quoique munies d’une membrane assez résistante, les cel- 
lules des saccliaromycètes sont fort délicates et se contractent 
facilement, de sorte que la structure devient indistincte ou tout 
il fait invisible. Il faut donc fixer les cellules avec le plus g-rand 
soin, sinon le protoplasme et la vacuole se contractent de la 
manière la plus fantaisiste, en prenant des formes qu’on pourrait 
aisément confondre avec des noyaux en division amitotique, 
tandis que la figure de division réelle est souvent déchirée, de 
sorte qu’on reçoit une impression tout à fait fausse. 
En fixant les cellules on risque : de plasmolyser les cel- 
lules. La division nucléaire s’accomplit souvent dans l’isthme de 
deux cellules et c’est là,précisément,la place où les protoplasmes des 
cellules mère et fille se séparent à la moindre plasmolyse, comme 
je Tai pu démontrer autre part (32); 2° de détruire la structure 
cellulaire et nucléaire, par des liquides fixateurs imparfaits, 
même quand ils peuvent passer à travers la paroi plasmatique, 
ou quand on les emploie à une concentration iso ou hypoto- 
nique, de sorte qu’on n’ait pas à craindre de plasmolyse. 
Pour éviter le premier danger, il faut employer des fixateurs 
d’une tonicité égale à celle des solutions de NaCl à 1 ,73 à 4,68 0,/ 0, 
selon le substratum sur lequel on a cultivé les cellules. Il s’en- 
suit qu’une solution concentrée de sublimé peut servir à cette 
étude. En ce qui concerne la solution de Flemming et celle 
d’acide picrique concentrée, ces liquides ne sont pas hypertoniques 
au suc cellulaire des levures. Il est inutile de dire qu’il ne faut 
jamais dessécher les cellules, fixées ou non. En les séchant à 
l’état frais, elles se plasmolysent énergiquement; en les séchant 
fixées, elles se contractent tout de même, la membrane cellu- 
laire n’étant pas assez résistante pour soutenir la cellule. Pour 
éviter le second danger, on ne saurait donner de règles géné- 
rales, il faut trouver empiriquement le liquide nuisant le moins 
à la structure cellulaire et nucléaire. 
Je citerai ici quelques-unes des méthodes les plus impor- 
tantes pour colorer les noyaux des levures. 
Une technique très approuvée et fréquemmeut employée est 
.celle de M. Moller (23, 24). 11 ne se servait pas. comme ses pré- 
