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L’agar-ag-ai* se gorille el absorbe 300 gramnies d’eau ; on le 
lave à plusieurs reprises et on regoutte. On prépare d'autre 
part une macération de 125 g’raniines de viande de bœuf dans 
700 c. c, d’eau, ({u’on porte à l’ébullition ; on filtre et on 
ajoute 20 gi’annnes de peptone de \\ itt(‘ et 5 gramnies de sel 
marin. 
Lors(|ue la peptone et le sel sont dissous, on ajoute la 
gélose et on fait bouillir quelques instants; l’agar-agar, gonflé par 
l’eau, se dissout très rapidement, sans ((u’il soit nécessair(‘ d’avoir 
recours à l’autoclave, et il ne laisse pas de résidu. Lors({u’il est 
bien dissous, on ajoute 10 c. c. de la solution normale de 
carbonate de soude, on filtre, sans coller au blanc d’œuf, sur 
papiiu' (diardin et on répartit en ayant soin de mettre ià 5 c.c. 
seulement dans cluKjue tube. On stérilise enfin à l’autoclave 
pendant 20 minutes à 11 O*’. 
A la condition d’avoir rnis la gélose à ti'empei* la veille, le 
milieu de Novy et Mac Nealpeut être prépare* en um^ heure. On 
le conserve en culots dans des tubes fermés avec des capu- 
chons de caoutchouc. La veille du jour où l’on doit s’en servir. 
on le fait fondre au bain-marie, on le laisse refroidir jusqu’à 
45^^ et on y ajoute 2 volumes de sang défibriné de lapin. On 
incline les tubes selon le mode ordinaire, on laisse la gélose 
faire prise et sécher légèrement sur b's bords ])endant 12 heures 
et lorsqu’on redresse les tubes, il S(‘ rassemble au fond J à 
2 c. c. d’eau de condensation dans lescjuels on ensemence. On 
capuchonne avec des capuchons de caoutcliouc et on laisse à la 
température de la chambre L dans l’obscurité. 
En ce qui concerne Tr. Duttuni^Xa sang à ensemencer a été 
prélevé purement dans le cœur d’une souris, ({ui présentait une 
moyenne de dix trypanosomes j)ar champ microscopique, et 
ensemencé pour la première fois en assez grande quantité. 
Les premières cultures se sont développées, dans tous les 
tubes ensemencés, du 10® au 15® jour, elles ont été réense- 
mencées à l’aicb' d’un jil de platine (‘t les secondes cultures se 
sont dévelop})ées dans le même temps, (^es secondes cultures, 
réensemencées au fil de platine^ ont donné des 3®^ cultures, (jui 
d. Pendant riiiviT, en ^nl^o])e, il est nécossaiia* de iiielire les ciiKures de 
trypan(3Süines à l’étuve à -a". La (einpéi-ature ü])linia ])üui‘ le d(-veloi)i)enienl 
de CCS cultures semble être, en elïet, de 25“ à 2()“. 
