ANNALES DE L’INSTITUT PASTEITI 
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nuait rajndoiiK'iit dans lt‘s li(|ui(les des tubes houcliés au 
coton. 
Supposant donc (jue l’intluence sur le développement (d sur 
la formation dus p^i-anulations pouvait être due à la toxine, nous 
avons cherché (à obtenir c(dle-ci concentrée*. 
Dafis ce but, une certaine (juantité de licjuide liltré fut éva- 
porée dans le vide à 45^, jusqu’au quart de son volume, puis 
ensemencé comme d'ordinaire avec des vibrions normaux. 
11 se produisit alors un fait absolument inattendu: après 
lu heures on avait un développement presque ég'al à celui des 
témoins, et ensuite la formation des g’ranulations ne fut pas 
plus rapi(h* (pie dans ceux-ci! 
Cette observation changea complètement le cours de nos 
idées : il devenait évident en effet que par l’évaporation une 
substance avait été éliminée, laquelh* jouait un rôle dans le phé- 
nomène qui nous occupe. 11 était ct‘rtainement (juestion d’une 
substance très volatile, puisque non seulement elle pouvait se 
dégager ;i basse température dans le vide, mais encore sponta- 
nément des liipiides laissés à eux-mêmes. 
11 n’était pas difficile d’imaginer quelle devait être cette subs- 
tance ; on sait qm* les cultures du vibrio Metchnikou'i. comme 
celles de tous les vibrions cholérigènes, produisent de grandes 
quantités d’ammoniaque ; il sufht, en effet, pour s’en rendre 
compte, de suspendre, à l’orilice d’uiVtube de culturi* bien dtVe- 
loppée, du papier de tournesol rouge légèrement mouillé, on le 
voit pres(jue instantanément tourner au bleu. 
De plus, la réaction du milieu nutritif acquiert rapidement 
une très forte alcalinité, certainement due à l’ammoniaque qui 
s’y forme. 
L’hy|)othèse que l’ammoniaque est la cause première du phé- 
nomène étudié par nous explique tous les faits que nous 
avons observés, et qui, jusqu’à présent, nous paraissaient con- 
tradictoiî*(‘s. c’est-à-dire les façons diverses dontse comportaient 
les liipiidt's de culture filtrés ou centrifugés, bien ipi’ils fussent 
placés dans des conditions en apparence identiques. 
D’autre part le fait que, après l’élimination spontanée, ou au 
moyen de l’évaporation dans le vide de l’AzHg, les milieux 
reprenaient leurs propriétés de milieux nutritifs, était aussi par- 
faitement (*xpliqué(‘. 
