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ANNALES DE L^NSTITUT PASTEUR 
microbiens par un procédé que l’un de nous a déjà indiqué, mais 
que nous rappelons brièvement L 
On sait que la germination s’effectue à l’abri des microbes, 
dansTeau distillée aussi bien que dans les solutions additionnées 
de substances minéralesL C’est donc l’eau distillée qu’il faut 
prendre comme milieu de comparaison, si l’on veut mettre en 
évidence les différences attribuables aux substances introduites 
dans l’eau de germination. 
On constate ainsi qu’à la température de 30®, le dextrose 
employé à une concentration de 4 0/0 retarde la germination 
de 4 à 5 jours; avec la glycérine à 2 0/0, le retard est encore 
plus sensible ; nous avons fixé ces différences par la photogra- 
phie (pl. YII.) 
En présence d’alcool éthylique à 1 0/0, le retard est de même 
ordre qu’avec la glycérine; l’alcool méthylique à 0,7 0/0 agit 
comme l’alcool ordinaire ; la paraldéhyde à 1 0/00 retarde égale- 
ment la germination du maïs, mais elle ne l’empêche pas, et, 
1. Le procédé auquel nous a,vons eu recours, consiste essentiellement en un 
lavage mécanique des graines. Celles-ci recueillies avec soin, conservées dans un 
endroit sec, à l’abri des poussières, sont débarrassées des parties rugueuses au 
moyen d’un scalpel flambé, lavées ensuite à l’alcool absolu, puis agitées pendant 
lü minutes avec du sable de Fontainebleau très fin, contenu dans un flacon avec 
un peu d’eau stérilisée. Après cette opération dont le but est d’enlever les germes 
adhérents, les graines sont lavées avec de Peau stérilisée, puis immergées pendant 
lo minutes dans du sublimé au 1/1,000. 
Cette immersion seule, même prolongée, n’est pas suffisante pour stériliser les 
graines. M. Geppert a montré* en effet, on reprenant les expériences de Koch** 
sur le pouvoir antiseptique du bichlorure de mercure, que celui-ci agit surtout 
par la quantité introduite dans le milieu de culture, quantité suffisante pour 
arrêter le développement des germes. Lorsqu’il précipite le mercure ainsi trans- 
porté, par le sulfhydrate d’ammoniaque, la spore de la bactéridie charbonneuse, 
peut se développer malgré un séjour prolongé de 24 heures dans le sublimé, au 
1/1000. Le bichlorure de mercure ne peut donc être employé seul pour la stérili- 
sation des graines, puisqu’il n’est efficace que dans des conditions qui gênent 
également le développement de l’embryon. 
Après leur sortie du sublimé, les graines subissent 4 à 5 lavages à l’eau 
distillée stérile, puis sont distribuées au moyen d’une pince flambée, dans des 
tubes à essai également stérilisés. Elles reposent sur de faibles tampons de coton, 
qui, placés à la surface de l’eau distillée, les maintiennent dans un état d’humidité 
convenable pour la germination (planche Vil). 
Lorsque les tiges ont atteint 15 à 20 centimètres de longueur, on les place dans 
des flacons à col étranglé, munis d’un fort tampon de coton. Ces flacons, d’une 
contenance de 2 à 3 litres (planche VIII), sont remplis d’une solution nutritive 
stérilisée à 120®. Ils portent une petite tubulure latérale fermée avec du coton 
qui permet l’introduction du liquide pendant toute la durée de l’expérience sans 
toucher à la fermeture principale. Il est très facile de vérifier la pureté des cul- 
tures. 
* Geppert. Sur la question des antiseptiques^ Berl. Klin. Vocb.,3), 1889. 
** Koch. Mitteilungen a. d. K. Gesundh.^ t. I, p. 234. 
