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ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUR. 
Pour nous, un corps ayant deux espèces de gToupemenlsac?//'s 
est toujours amphophile. 
Après avoir démontré que l’azur en solution aqueuse ou alcoo- 
lique, colore assez bien le protoplasme et le noyau des pro- 
tozoaires, fixés dans l’alcool absolu, et que l’éosine en solution 
aqueuse très faible (1/20,000) les différencie, nous avons tâché 
de rendre ces deux couleurs plus sensibles en les unissant avec 
le bleu de méthylène, et obtenir ainsi de jolies préparations en 
très peu de temps. 
Dans ce but, on mélange une solution aqueuse de bleu de 
méthylène et d’azur (bleu, 0"S50 ; azur, 0?%b0 ; eau, 1 00 grammes) 
avec une solution aqueuse de carbonate de soude (O^L^hO 0/0); 
puis, après un séjour de 24-48 heures à l’étuve à 37®, ou mieux 
au thermostat à une température plus élevée, on unit ce mé- 
lange avec une solution aqueuse d’éosine. Cette solution varie 
selon la qualité du bleu. Il faut l’établir par tâtonnement 
(0"’^,10-0"^25 0"^30 0 0). Ensuite on filtre ce mélange et on 
obtient une poudre soluble dans l’eau et dans l’alcool méthy- 
lique. 
C’est précisément cette poudre dissoute dans l’alcool méthy- 
lique qui sert dans notre coloration etqui agit avec une rapidité 
énorme, quand elle est au contact des protozoaires et neutralisée 
sur la lamelle, par une solution aqueuse d’éosine. 
L’éosine, peut-être, dans ces conditions, agira-t-elle comme 
matière colorante, et aussi comme mordant. 
Méthode de coloration . 
. On dissout le bleu préparé comme il vient d’être dit dans la 
proportion de 0?^04 pour 20 c. c. d’alcool méthylique pur, et 
l’éosine dans la proportion de 0"^0 ü en 1,000 d’eau. 
Sur une lamelle de 18 millimètres contenantdu sang avec des 
protozoaires, on met 4 petites gouttes (4/30 c. c.) qu’on fait agir 
3 minutes précises et puis, sans laver, on laisse tomber sur le bleu 
8-10 gouttes de la solution aqueuse d’éosine, qu’on fait agir 
2 minutes. 
Si les lamelles sont plus grandes (22 millimètres) on met une 
plus grande quantité de bleu (8-10 gouttes) et d’éosine (16-20 
gouttes). 
Si, au lieu de se servir de lamelles, on emploie des lames, on 
