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Herrn, Rautniann 
weiteres unbedingtes Erfordernis für eine Doppelreinkultur war nun 
aber, daß mit den Paramaecieu selbst keine andern Organismen in 
die Kulturflüssigkeit hineingetragen wurden. 
Um diese Forderung zu erfüllen, ging ich folgendermaßen vor: 
Als Ausgangsmaterial für eine Kultur diente mir immer nur 
ein Tier 1 ). 
Das isolierte Tier wurde in ein steriles Uhrschälchen 2 ) mit 
sterilem Wasser gesetzt, hierin zunächst etwa 5 Minuten belassen und 
dann in ein neues »Bad« von sterilem Wasser übergeführt. Diese 
Prozedur wiederholte ich mindestens 3 — 4 mal in der gleichen Weise. 
Die Übertragung des Tieres von einem Uhrschälchen ins andre geschah 
natürlich mit steriler Pipette. Da die Paramaecien in einem Wasser, 
das keine festen Partikelcheu enthält, fast fortwährend hastig kerum- 
schwimmen und dabei selbstverständlich ihre Cilien lebhaft bewegen, 
so dürfte es andern Organismen schwer werden, längere Zeit am 
Körper eines derart behandelten Paramaeciums haften zu bleiben. 
In der Tat ließen sich mit dieser Methode der »Sterilisation« recht 
gute Resultate erzielen. 
Wenn nun aber auch in Paramaecienkultureu, welche auf diese 
Weise angelegt werden, im allgemeinen keine andern Organismen 
außer der einen als Nahrung verwendeten Bakterienart mehr vor- 
handen sind, so ist es doch oft unvermeidlich, daß durch das Offnen, 
Nachsehen nsw. der Kulturen mit der Zeit andre Organismen (nament- 
lich Bakterien und in der Luft vorhandene Sporen von kleinen 
Flagellaten neuerdings hineingeraten und dort günstige Entwieklungs- 
bedinguugen linden. 
1 Da die Brauchbarkeit des Tiermaterials je nach der Herkunft in weiten 
Grenzen zu schwanken pflegt, so empfiehlt es sich, im Anfang eine möglichst 
große Zahl solcher als Ausgang dienender Kulturen mit je einem Tier anzusetzen. 
Man kann sich dann fiir die Versuche die geeignetste Kultur auswählen. 
Da Tiere verschiedener Herkunft sich außerdem immer erst an die neue 
Nahrung gewöhnen müssen, so empfiehlt sich folgende Methode: Paramaecien 
verschiedener Herkunft werden nur einigermaßen von andern Organismen ge- 
reinigt und dann zusammen in einem Uhrschälchen in einer Aufschwemmung 
von Proteus m. gezüchtet. Zeigen sie eine gute Vermehrung, so werden einzelne 
Tiere von ihnen isoliert und. wie oben beschrieben, weiterkultiviert. 
2 ) Die Uhrschälchen und sonstigen zur Verwendung gelangenden Glas- 
gefäße sterilisierte ich durch Einlegen in siedendes Wasser; die Pipetten wurden 
durch mehrmaliges Einsaugen und Ausstößen von kochendem Wasser sterilisiert; 
in dem Reagenzgläschen erhitzte ich eine kleine Quantität Wasser für einige 
Minuten zum Sieden. 
