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Hans Kupelwieser 
von beiden oder einem der beiden Faktoren erreicht man schon deswegen 
keine Verbesserung der Ausbeute an normalen Entwicklungsstadien, 
weil mit Verbesserung der Bedingungen für das Eindringen überhaupt, 
gleichzeitig die Bedingungen für Polyspermie verbessert werden. Das 
Ei vermag sich gegen das Eindringen von mehr als einem Spermatozoon 
nicht zu schützen. 
In vielen Fällen hat es sich als praktisch herausgestellt, die Kon- 
zentration des Spermas hoch und die Expositionszeit kurz zu wählen, 
also z. B. stark konzentriertes Sperma nur 10 Minuten lang einwirken zu 
lassen und dann die Eier durch mehrmaligen Wasserwechsel vom Sperma 
möglichst zu befreien. Vielfach genügt diese kurze Expositionszeit nicht; 
wo sie aber genügt, erreicht man damit zunächst eine Gleichförmigkeit 
der Kultur dadurch, daß der Entwicklungsanstoß, das Eindringen des 
Spermatozoons überall gleichzeitig erfolgt. Abgesehen von dieser Gleich- 
förmigkeit, die einen großen Vorteil für das cytologiscke Studium der 
Kulturen mit sich bringt, sprechen noch andre Gründe dafür, die Methode 
der kurzen Expositionszeit, wo irgend möglich, zu bevorzugen. 
Die Entwicklung der bereits befruchteten Eier wird nämlich durch 
Sauerstoffentzug gehemmt, wenn die Eier weiter im stark spermahaltigen 
Seewasser verbleiben; ferner mögen auch giftige Ermüdungsstoffe von 
den Spermien abgeschieden werden, ganz abgesehen von der Schädigung 
durch das Vorhandensein von viel abgestorbenen Spermatozoen in der 
Kultur. 
Der mehr normale Ablauf der Kulturen, die mit hoher Sperma- 
konzentration und kurzer Expositionszeit angesetzt waren, beruht zum 
Teil auch darauf, daß sich gerade hier ein Teil der Eier mit Befruchtungs- 
membranen abfurchten, was sonst nicht der Fall ist, so daß es den An- 
schein hat, als wenn diese Methode verhältnismäßig günstige Bedingungen 
für ein gleichzeitiges Zusammentreffen von Befruchtung und Membran- 
bildung mit sich brächte. 
Membranbildung. Wie ich schon vor 6 Jahren ('06) gezeigt 
habe, können die Seeigeleier, wie durch viele künstliche Mittel auch durch 
fremde Spermien (von Mytilus, Chiton, Asterina, Asterias ) sowie durch 
Spermaextrakte 1 ) zur Membranbildung veranlaßt werden und neuer- 
!) Loeb hat an verschiedenen Stellen, unter anderm in seinem Buch über »che- 
mische Entwicklungserregung« ('09, S. 196) angegeben, daß ihm die Wiederholung 
meiner Versuche über die membranbildende Wirkung von Samenextrakten nicht ge- 
lungen ist, so daß ich selbst schon daran dachte, daß mir bei diesen Versuchen ein Fehler 
unterlaufen ist. Ich hatte damals die großen notwendigen Samenmengen durch Aus- 
quetschen der Hoden mit dem Neusilberspatel gewonnen und es war möglich, daß 
