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Emerico Luna 
Materiale e metodo di ricerca. 
Come materiale cli stutlio mi son servito delle uova e delle larve di 
Bufo vulgaris, trattate con metodi diversi, ma prevalenteniente col metudo 
Regaud : in alcuni casi ho trattato le larve di Bufo col metodo consigliato i 
da Rubashkin, fissando nel liquido di Maxbiow, senza perö ottenere i 
buoni risultati. In qualche caso mi son servito del metodo Benda onde 
ottenere dei preparati di controllo. II metodo che mi ha dato i migliori 
risultati e quello del Regaud: dovendo fissare pezzi non molto piccoli j 
io nso aggiungere al liquido fissatore qualche goccia di acido acetico J ), 
secondo questa formula: 
Bicromato di potassa al 3% cc. 20 
Formalina cc. 4 
Acido acetico .... gocce 1—2 
Uova, piccole larve e segmenti di grosse larve venivano immerse per 3 giomi 
in tale liquido fissatore, avendo cura di cambiare il liquido al 2° giorno. 
Indi cromizzavo per 10 giomi in una soluzione di bicromato potassico 
al 3%, rinnovando ogni tre giorni il liquido. Successivamente lavaggio 
per 24 ore in acqua corrente ed inclusione in paraffina. Le sezioni. di 
H 4—5, erano incollate col metodo Henneguy: indi. dopo i comuni pas- 
saggi, si mordenzavano per 24 ore in una soluzione di allume di ferro al 
4%, tenuta ad una temperatura di circa 35°: in seguito breve lavaggio 
in acqua distillata, e colorazione per 24 ore in ima soluzione di ematossi- 
lina, formata al momento da una parte di ematossilina alcoolica matura 
al 10% e da nove parti di acqua distillata. Indi breve lavaggio in acqua 
di fonte e differenziazione in allume di ferro all’1%; acqua di fonte per 
30', Serie ascendente degli alcool, xilolo, balsamo. 
Nello Studio dello sviluppo dei plastosomi in Bufo ho dovuto superare 
una grave difficoltä, data appunto dalTenorme quantitä di pigmento 
contenuto nelle cellnle dei vari tessuti e che disturba l’osservazione. Ho 
tentati tutti i metodi comuni di depigmentazione, ma essi non permettono 
rulteriore colorazione dei plastosomi. Son riuscito finalmente ad avere 
ottimi risultati depigmentando i pezzi in toto col metodo Alfieri 
i) Recentemente Bertrand ha comunicato un nuovo metodo per la ricerca 
dei plastosomi (Un nouveau procede pour la recherche des mitochondries, Biblio- 
graphie Anatomique, tome XXIII, 1913). Piü che di un nuova metodo, si tratta di 
una modificazione del metodo Regaid, consistente nell’ aggiunta di alcime gocce 
di acido acetico al liquido fissatore. L’A. evidentemente non e a conoscenza dei 
miei lavori precedenti, e quindi non sa che giä prima di lui ho modificato la formola 
del liquido Regaud, aggiimgendoci alcune gocce di acido acetico. 
