1 117 
krachtigen  buffer  voor  liet  coiistaiit  lioudeti  der  ware  reaetie,  is 
ketinelijk  even  nulteloos  als  experiineuleereii  zonder  therinoslaat  in 
een  kamer  van  sterk  veranderlijke  temperatuur. 
Bij  het  vaststellen  van  de  beste  voorwaarden  voor  de  beiialing 
dezer  constante  n,  leidden  twee  overwegingen  de  keus  van  de  pii 
van  het  reguleerende  phosphaat-mengsel. 
Daar  tn  reeds  was  gebleken  een  functie  te  zijn  van  pn  met  een 
duidelijk  maximum,  zou  de  pn  van  dit  maximum  het  voordeel 
geven,  dat  hier  een  geringe  verandering  van  pu  een  kleiner  verschil 
in  m zou  meebrengen  dan  elders. 
Ten  tweede  moest,  om  den  invloed  der  onvermijdelijke  experimen- 
nc 
teele  fouten  te  beperken,  de  coëfficiënt  — niet  veel  grooter  of 
0,434  ^ 
kleiner  zijn  dan  a.  Immers,  indien  de  coëfficiënt  van  loy  ^ — sterk 
overweegt,  verloopt  de  reactie  praktisch  als  de  gewone  logarithmische 
lijn  van  de  monomoleculaire  reacties.  Daarentegen  zal,  als  n veel 
grooter  is,  een  nagenoeg  rechte  lijn  te  voorschijn  komen. 
Daarom  werd  een  mengsel  van  Na^HPO.,  2 aq  en  KHjPO^  gebruikt 
in  zulke  verhouding,  dat  de  enzymwerking  verliep  in  een  8 “/o 
phosphaatoplossing  van  ongeveer  pn  = 7,5. 
De  materialen  waren  de  volgende : 
Gewone  gele  Soja-boonen  worden  fijngemalen  onder  vermijding 
van  verwarming  door  de  wrijving;  het  |)oeder  bewaard  in  een 
gesloten  stopflesch  in  het  donker. 
De  KH^PO^  en  Na,  HP04  2aq  waren  de  zuivere  stoffen  van 
Kahlbaum,  gemerkt  ,,zu  Enzymstudien  nach  Sörensen”.  De  ureum, 
van  Kahlbaum,  werd  nog  eens  omgekristalliseerd  uit  alcohol. 
Alle  experimenten  van  dit  onderzoek  werden  uitgevoer-d  bij  27°  C. 
Deze  temperatuur  is  juist  hoog  genoeg  om  zonder  moeite  gedurende 
bijna  het  geheele  jaar  met  een  waterbad  te  werken  en  aan  de  andere 
zijde  laag  genoeg  om  de  schadelijke  werking  van  hooge  temperatuur 
op  het  enzym  te  voorkomen,  althans  binnen  redelijke  grenzen  van 
tijd  en  ware  reactie. 
7,28  gr.  Na,HPO,  2aq  en  2,32  gr.  KH,PO,  werden  opgelost  in 
een  maatkolf  met  stop  tot  100  cc. 
In  deze  oplossing  werd  0.4  gram  Soja-rneel  gebracht,  de  tlesch 
doorgeschud  en  gedurende  een  uur  in  het  bad  van  27°  gelaten.  Na 
toevoeging  van  0.4  gr.  kiezelgur  (te  voren  goed  gewasschen  en 
gedroogd)  werd  het  extract  snel  en  volmaakt  helder  afgefiltreerd  door 
een  gewoon  vouwfilter.  Terzelfder  tijd  was  een  oplossing  bereid 
van  14.4  gr.  Na,HPO,  2 aq.  in  150  cc.  water.  Hieraan  werden  nu 
72* 
