Boi. Mus. Para. Emílio Goeldi, sér. Boi. 18(1), 2002 
em câmara úmida previamente aquecida, a qual foi depositada em uma 
incubadora biológica a 37°C, por 30 minutos. Após este período, a 
lâmina foi retirada da câmara úmida para a evaporação da solução. 
Para o processo de preparação de lâminas semi-permanentes, uma 
gotícula de glicerina foi adicionada a este material, cuja lâmina foi coberta 
com lamínula e vedada com esmalte sintético. Os resultados foram 
analisados em um microscópio ótico OLYMPUS Modelo BH-2, 
contando-se 500 grãos de pólen por lâmina em cinco a seis campos 
distintos. Os grãos de pólen viáveis assumem uma cor azul escura, c os 
inviáveis não sofrem alteração de cor. 
A razão pólen/óvulo (P/O) foi determinada a partir da contagem 
dos óvulos e grãos de pólen por flor, de acordo com estudos feitos 
porCruden (1977). ParaCruden (1981), esta relação reflete a eficiência 
da polinização, sugerindo que o estudo da razão P/O é ainda o melhor 
indicativo para se inferir o sistema reprodutivo das plantas. A contagem 
do pólen obedeceu à metodologia de Dafni (1992), que consiste em 
macerar uma antera fechada em solução de 0,5 ml de álcool a 70%, 
quatro gotas de detergente e três gotas do corante azul de metileno, a 
0,5%. Adiciona-se álcool, a 70%, até completar Iml. Foi colocado 
Iml desta solução em seis lâminas. Os grãos de pólen foram contados 
por volume de suspensão. Este procedimento foi testado em dez 
anteras de flores diferentes. A média do número de grãos de pólen 
foi calculada e multiplicada pelo fator de diluição e pelo número de 
anteras por flor. O número de óvulos foi determinado pela contagem 
destes no ovário da mesma flor usada para contagem de pólen. A 
razão pólen/óvulo foi determinada pela divisão estimada do número 
total de grãos de pólen pelo número de óvulos. Testes complementares 
de autopolinização espontânea foram realizados para fins de 
comparação com os resultados da razão pólen/óvulo. Um dia antes 
da antese, 25 inflorescências distribuídas em cinco indivíduos 
diferentes, cinco em cada planta, foram protegidas com sacos à prova 
de pólen e insetos para verificar a ocoirência ou não de autopolinização 
c, consequentemente, a formação de frutos. 
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