1450 
Bij mijn eigen kweekproeven met Ustilagineën en Torulaceën 
heb ik eveneens den invloed van het phosphaatgehalte van den 
voedingsbodem waargenomen en er mij op toe gelegd, blijvende 
culturen te verkrijgen, welke geheel van volutine ontbloot zijn. 
Hiervoor is het niet voldoende bij de agar-culturen het phosphaat 
weg te laten ; wel is het grootste deel der cellen dan vrij van 
volutine, maar toch worden er in een alkohol-uitstrijkpreparaat nog 
verscheidene in het gezichtsveld gevonden, die volutine dragen. 
Volutinekorrels tijdens het leven te herkennen tusschen de glyco- 
geendruppels in het celplasma, is mij onmogelijk gebleken. Het is 
dus noodzakelijk bij het controleeren den kweekproeven uitstrijk- 
preparaten te fixeeren. Hiervoor voldeed bij Torula en Ustilago zeer 
goed absolute alkohol, iets minder goed bij Saccharomyces, waar, 
zooals ook door Henneberg 1 ) wordt aangegeven, na fixatie in alkohol, 
door 1 procent zwavelzuur het cellichaam niet voldoende wordt 
ontkleurd. 
Bij de samenstelling van den voedingsbodem werd, wat de voe- 
dingstoffen betreft, uitsluitend met chemisch zuivere prepraten gewerkt, 
de agar 1 uur met 0.5 procent azijnzuur uitgetrokken en vervolgens 
herhaaldelijk met gedistilleerd water uitgewasschen. Gebruik van 
leidingwater werd bij deze proeven vermeden. 2 ) Als voedingsstoffen 
werd aanvankelijk gebruikt 5 procent glycose (pro analysi), 0.5 procent 
pepton Merck, 0.05 procent Mg S0 4 (pro analysi) en een spoor KN0 3 
(pro analysi). Onderzoekt men volgens de methode van Neumann 3 ) 
(phosphorusbepaling langs den natten weg) of er nog phosphorus in 
dezen bodem aanwezig is, dan blijkt dit inderdaad het geval te zijn, 
wat in hoofdzaak aan het pepton te wijten is. In het laboratorium 
uit kippeneiwit bereide albumose werd evenmin volkomen vrij van 
phosphorus verkregen. Wordt als N-bron zuiver glycocoll of aspara- 
gine gebruikt, dan wordt macrochemisch met de methode van 
1) 1. c. bldz. 5. 
2 ) Het is opmerkelijk, dat Reichenow reeds de methyleenblauw — zwavelzuur- 
reactie zag wegblijven bij zijn Haematococeen, wanneer hij alleen de toevoeging 
van -phosphaat achterwege liet, Bij de opgave der cultuurvloeistoffen wordt zelfs 
niet het gebruik van gedistilleerd water vermeld. Vermoedelijk kunnen de door mij 
onderzochte hypho- en blastomyceten zich van kleinere hoeveelheden phosphorus- 
verbindingen in de voedingsvloeistof meester maken door deze door Reichenow 
bestudeerde volvocaceeën. 
3 ) Volgens deze methode wordt de stof, welke men wenscht te onderzoeken 
verbrand met 10 cM*. gedistilleerd salpeterzuur s.g. 1.4 en sterk zwavelzuur aa. 
Voor nauwkeurige opgave zie Hoppe Seyler. Handbuch d. physiol. und pathol. 
chem. Analyse, bldz. 359. Na verbranding werd na neutralisatie met ammonium- 
jnolybdaenaat op phosphorzuur gereageerd. 
