4L) ANNALES DE L’INSTITUJ PASTEUR 
milieu de culture, nous croyons utile d'indiquer ici la préparation 
de ce dernier. On fait tout d’abord un extrait glycériné de pom- 
mes de terre, à raison de 1 partie de pommes de terre pour 2 par- 
ties d’eau glycérinée à 4 0/0, ainsi que du bouillon de viande de 
veau (une partie de viandepour 2 parties d’eau physiol.à 7,5 0 /00. 
Le bouillon fdtré sur linge et l’extrait sont additionnés de soude 
jusqu’à ce qu’ils soient très légèrement alcalins au papier de tour- 
nesol. Ensuite, à un volume d’extrait, on ajoute 2 volumes du 
bouillon de viande et un volume d’eau physiologique à 7,5 0/00. 
On incorpore à ce milieu 3 0 /O de gélose et on le distribue, à rai- 
son de 10 c. c. par tube, dans de grands tubes de 30 centimètres 
de longueur sur 2 cent. 5 de diamètre. Enfin, ces blocs gélosés 
étant fondus, on y mélange intimement un volume égal de sang 
défibriné de cheval, et le milieu est incliné comme le sont les 
tubes de gélose ordinaire, de façon à offrir une large surface à 
l’air. 
Sur ce milieu, le microbe coquelucheux forme une couche 
assez épaisse; on enlève celle-ci après 3 jours au moyen d’une 
baguette stérile en verre et on délaie dans 20 c. c. d’eau conte- 
nant 6 0/00 NaCl les microbes fournis par 15 tubes de culture. 
L’émulsion ainsi obtenue est desséchée pendant 3 jours à 37°' 
dans le vide, en présence de potasse caustique. Le résidu est broyé,, 
puis additionné de 330 milligrammes de NaCl sec et stérile et 
trituré avec ce sel, de façon à obtenir une poudre (630 milli- 
grammes environ pour 15 cultures) aussi fine et aussi homogène- 
que possible. Cette poudre peut être conservée sèche assez 
longtemps, tout en gardant ses propriétés. Elle est ensuite broyée 
dans 60 c. c. d’eau distillée stérile, additionnée par petites 
portions. On obtient ainsi un liquide louche, salé à 7, 5 0/00; il 
s’y produit assez souvent des flocons, comme dans d’autres 
endotoxines, ainsi que Besredka l’a remarqué. On laisse le tout 
24 heures à froid, puis on centrifuge; on décante le liquide sur- 
nageant qui est presque limpide, très légèrement opalescent. 
Injecté à la dose de 1 /4 à 1/2 c. c. dans le péritoine d’un 
cobaye, ce liquide détermine la mort de l’animal, généralement 
en 24 heures. A l’autopsie, on trouve des lésions identiques à 
celles que produit l’injection intrapéritonéale de microbes coque- 
lucheux : exsudation péritonéale très abondante, hémorrhagique, 
pétéchies sous-péritonéales très nombreuses, surtout sous le- 
