504 ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUR 
constitue le grain jaune macroscopiquement visible; et il s’agit 
très vraisemblablement du staphylocoque ordinaire aggloméré, 
opinion qui a été soutenue plusieurs fois. 
Ainsi donc voilà trois microbes, différents qui, modifiés par 
le contact des éléments cellulaires des nodules, acquièrent les 
mêmes affinités colorantes; ce ne sont sans doute pas les seuls 
qui se comportent ainsi. Il y avait là un rapprochement utile à 
faire. 
Fixation. — - Nous avons opéré quelquefois par congélation 
après fixation au formol dilué, mais il est préférable de se servir 
du fixateur suivant et de procéder par inclusion. 
Alcool à 90° saturé d’acide picrique.. 50 c. c. 
Alcool à 90° additionné de 1 /10 e de HgCl 2 50 c. c. 
Formol à 40 0 /0 2 c. c. 
Durée de la fixation : 1 à 2 jours; lavage, alcool iodé pour 
enlever le sulbimé; acétone, xylène, paraffine. Les coupes sont 
collées au Schœllibaum; après enlèvement de la paraffine on les 
débarrasse de l’acide picrique restant par un séjour de 12 heures 
au moins dans l’eau ordinaire; ne jamais les laisser sécher. Pro- 
céder à la coloration par l’une des méthodes suivantes. 
1° Méthode de Gram modifiée. 
a) Coloration du fond par le carmin. On se servira de carmin 
aluné acétique selon la formule. de Henneguy, ou d’acide carmi- 
nique aluné; la coloration demande environ 10 minutes; si l’on 
se sert d’acide carminique on enlève l’excès de colorant par 
l’alcool chlorhydrique (alcool absolu 50 c. c. ; acide chlorhydrique 
4 gouttes) ; dans les deux cas laver ensuite la coupe à l’eau pen- 
dant quelques instants. 
b) Coloration des touffes d’actinobaciîles avec le violet de 
méthyle 6 B. 
Eau formolée à 2 pour 100 50 c. c. 
Solution alcoolique saturée de violet de méth. 6 B . . . 4 c. c. 
Laisser agir la solution de violet de 2 à 4 heures environ sur 
la coupe. 
c) Différencier avec, la solution iodo-iodurée habituelle pen- 
dant quelques secondes. 
d) Décoloration de la coupe. La décoloration est assez délicate; 
